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问
大家做dapi染色常用浓度是多少,0.5-10ug/ml的范围太广了
balalaLy
dapi可以透过完整的细胞膜,跟DNA的结合能力很强,大多数细胞0.1ug/ml就能染上。浓度低一点可以适当延长染色时间,浓度高一点就缩短一下时间,以免过曝。
6 回答
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问
基因组得率比较低,怎么提高?
whilt-shirt
更换进口的成品试剂盒,基本上得率都还可以
4 回答
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问
我再提DNA的时候,A230比值的吸光度老是过低,重复了好多遍都这样,1.0左右,有什么解决方法吗
生如夏花zzh
纯化不好 可能需要更换试剂盒再试试看
4 回答
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4 回答
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问
什么情况下需要包被培养板和培养瓶?
balalaLy
一般根据细胞特性或者实验目的考虑要不要包被以及用什么包被。比如我做乳鼠神经元原代培养要用多聚赖氨酸包被,耳蜗基底膜原代培养要用鼠尾胶包被。
5 回答
659 围观
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问
样品几丁质含量过多,会不会影响DNA的提取?
汤姆卜丽波
如果过多的话。是会影响的。多糖的污染是提取核酸时常遇到的一个棘手的问题。植物组织中往往富含多糖,而多糖的许多理化性质与核酸很相似,因此很难将它们分开。在去除多糖的同时核酸也被裹携走了,造成核酸得率的减少;而在沉淀核酸时,也产生多糖的凝胶状沉淀,这种含有多糖的核酸沉淀难溶于水,或溶解后产生粘稠状的溶液。由于多糖可以抑制许多酶的活性,因此污染了多糖的核酸样品无法用于进一步的分子生物学研究。所以必须去除
3 回答
373 围观
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问
质粒提取过程中的问题?
天一湖医者
首先确定下做阳性重组子鉴定的时候是否是两条带,如果是单一条带的话,也有可能出现空载体的情况,有可能是空载体的片段段量小,不易观察
4 回答
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问
STC-1细胞传代后多久贴壁
天一湖医者
文献里看到的最快的贴壁是在传代2个小时以后。
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问
invasion assay之后细胞总是在膜边缘一圈
balalaLy
有没有可能是铺胶的时候量太少了?导致边缘的胶比较少,细胞容易穿过去?
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问
DNA提取物多久会失效呢?如唾液。应该如何有效保存呢?
生如夏花zzh
如果条件允许的话,建议-80冰箱保存。
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问
提取细胞的DNA后进行PCR,然后进行电泳,出现了非特异性的条带,可能的原因?
迟C迟
非特异性条带的出现跟引物特异性不高直接相关,建议重新设引物,或者多看文献,看别人发表的用的什么引物。
5 回答
347 围观
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问
DNA跑胶后条带弥散的原因?
bamboopiggy
dna降解了?胶配的不匀?用的buffer有问题?这些都是可能的,你要一项一项的排除。
4 回答
5076 围观
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问
DNA提取过程中内源性核酸酶如何有效抑制?
lyang556
在提取内源核酸酶含量丰富的材料的 DNA时,可增加裂解液中螯合剂的含量,细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔。
3 回答
1063 围观
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问
最近贴壁细胞传代,胰酶消化到光镜下细胞脱落到大片成团终止消化,吹打离心重悬,但传好的培养瓶里总是有成团的细胞没散开,是什么原因呀
whilt-shirt
这种情况一般是没有完全吹散,建议反复多次吹打
3 回答
656 围观
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问
大鼠三叉神经节在什么位置?
dxywode
你可以参考一下文献,希望对你有帮助。
4 回答
4759 围观
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问
发现细胞里有一些小的团块 贴壁不知道是不是污染了?
Keven轩
应该是真菌污染,及时扔掉然后清洗培养箱
4 回答
426 围观
4 回答
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问
真菌DNA提取时能否患酶呢
dxywode
用CTAB法非常好,不用酶类,而且效果很好,我就是用这个提的。
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454 围观
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问
细胞真菌污染怎么避免,如果已经污染了,通过pbs洗有用么
未来9
真菌污染预防方法:1),将细胞移出来,用微量硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里加适量硫酸铜或者酸氢二钠高盐液体防止霉菌2)孵箱应定期清洁,大约一个月左右清洁一次,3)可在培养基里加两性霉素或制霉菌素)或[放线菌素D或双抗进行预防。4)最主要的还是要培养良好的无菌观念,实验室尽量不要大声说话,佩戴好口罩,手套,操作时应小心,避免培养基撒入培养箱以及生物安全柜,这些撒入培养箱的培养基为细菌及真菌的
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538 围观
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问
MKN45细胞不太好消化,大约消化多长时间才合适,如果消化损失过多会导致污染么
dxywode
消化我一般都胰酶在37°消化4分钟后,才能消化下来。就只能这么养,现在已经传了好多代。
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653 围观
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问
细胞培养过程中如何保持细胞的低分化状态?
未来9
动物的细胞在细胞培养过程中只能增殖不能分化,在实验室养了无数次细胞,既不会分化,也不会无限增值,正常50代左右。癌细胞可无限增殖,但也不会分化。 动物细胞的培养有各种用途,一般而言,动物细胞培养不需经过脱分化过程
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问
内质网分离的条件,速度和时间是多少呀?
dxywode
如果只是从内质网中提蛋白的话,你超3到4个5s左右就行了,其实如果用比较强的lysis组合,不用超声,votex估计也差不多了.
4 回答
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