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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
请问复苏细胞大概24h后观察细胞呈圆形,而且看得像黑点点的,是不是表示细胞都死了啊,还是贴壁不好呢
huarenqiang5
如果这些黑点是污染物,那么培养基会在1-2天内变浑浊,同时镜下可观察到这些黑点呈爆发式生长、并且显微镜中看到的菌是没有规律且快速的游动,另外如果是支原体污染在400倍显微镜下是看不到的。如果培养基不会浑浊,可排除污染,这些黑点有两个来源:细胞内的黑点是分泌泡,本身是透亮的,由于对焦折光的原因变成暗黑色,属于正常存在现象,但是会随着细胞状态变差而出现分泌泡增多;细胞间的黑点是死亡后的碎
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问
设计将一个人源TP53编码序列区CDS克隆至真核表达载体中构建一个表达TP53和GFP融合蛋白表达质粒
土井挞克树
选择表达载体。比较常用的了PCI-neo, pCMV, pEGFP等。
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问
转化过程目的基因TA克隆出现的问题讨论
土井挞克树
分子量这么接近的两种物质建议分开跑胶,最后跑胶效果好一些
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问
噬红作用
lyang556
直接在丁香实验搜“巨噬细胞功能实验”就行了,有完整的操作步骤和注意事项!
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问
小鼠牙乳头干细胞鉴别求助
土井挞克树
是分化了,实验条件有问题,现在的细胞不算是牙乳头细胞。
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问
细胞迁移数据分析
喝不醉的可乐
抑制迁移,一般来说不可能是比0h还要宽,你看看实验是不是哪里有问题,或者你用2%-5%的培养基试一下,不要用无血清培养基。
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问
荧光免疫层析
Dr_劉医生
模拟物其实不具有参考性,实验设计前多准备一个样本,用来做预实验
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问
细胞流式
土井挞克树
当然可以,细胞流失的功能很强大,你说的都可以检测到,还可以检测的通路
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问
神经元做细胞爬片用多聚赖氨酸包被相关问题
土井挞克树
24孔板内放小圆玻片做爬片,PLL浓度0.1mg/ml包被24小时
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问
P62被降解,LCII会不会也被溶酶体降解呢?急
土井挞克树
不会的,p62通路对LCII有交叉作用,但不会引起溶酶体降解LCII
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问
有人知道放射性膀胱炎综述该投哪个杂志吗?有推荐吗?
徐彩云6
可以试试《医学综述》、《临床泌尿外科杂志》。
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问
LC3最近是怎么了呀,只能看到I,II只有浅浅的痕迹,电泳转膜条件都没变,蛋白也是新提的
天一湖医者
很有可能是蛋白问题,尤其是一些难研磨组织,血管,小肠,肌腱,骨头。可以考虑选一种新的蛋白提取的方法来解决。
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问
配置好的棕榈酸溶液储备液的保存
Dr_劉医生
需要加热,放55℃水浴加热10-15min就行
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问
怎么建立 SkinEthic ™ RHE模型?
Dr_劉医生
SkinEthicTM RHE三维重建表皮模型构建方法:采集正常人类角质形成细胞后,在聚碳酸酯膜上经过体外培养而成。这篇文献有详细构建方法学SkinEthic™ RHE for in vitro evaluation of skin irritation of medical device extracts. Pellevoisin C, Videau C, Briotet D, Grégoire
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问
茜素红染色
Dr_劉医生
对照组也有染红,提示可能组织有钙质变化。茜素红染色的步骤和注意要求:1. 成骨诱导分化结束后,吸去六孔板中的成骨诱导分化完全培养基,用1×PBS轻柔洗涤2~3次。2. 每孔加入2mL 4%多聚甲醛溶液(或10%福尔马林),室温固定30min。3. 吸去固定液,用1×PBS轻柔洗涤2~3次,确保将固定液清洗彻底。4. 每孔加入2mL茜素红工作液,室温染色5~10min。5. 吸去茜素红染色
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问
细胞培养瓶从培养箱拿出来放到超净台需要喷酒精吗?
土井挞克树
最好喷,不喷容易杂菌污染,影响后续实验
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问
ROC曲线出现这种情况什么意思
Dr_劉医生
结局变量有重复,BY和WEIGHT每次命令行处理一个就行,分开来。
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问
求助:如何直观地观察到加了羊血的BHI培养基里菌有没有长起来?
Dr_劉医生
镜下观察培养基的生长状态,形态等,肉眼观察菌落周围的培养基没有变化,红细胞没有溶解或缺损,
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问
细胞被什么污染呢,具体现象在下面描述
汤姆卜丽波
这个背景太脏了,那个链状的看起来有点像不小心划到了,成团的可能是细胞碎片,有可能是环境问题
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问
共聚焦实验怎么选染料?
Dr_劉医生
由于共聚焦显微镜是以单一波长的激光作为光源,因此在选择荧光染料时要根据共聚焦显微镜配备的激光器波长选择,如果在同一样品中有多种荧光染料标记,还要考虑它们的发射波长尽量不要重叠,避免串色问题。
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