请问复苏细胞大概24h后观察细胞呈圆形，而且看得像黑点点的，是不是表示细胞都死了啊，还是贴壁不好呢

不是细胞死亡，镜下黑点就是细胞，

如果这些黑点是污染物，那么培养基会在1-2天内变浑浊，同时镜下可观察到这些黑点呈爆发式生长、并且显微镜中看到的菌是没有规律且快速的游动，另外如果是支原体污染在400倍显微镜下是看不到的。如果培养基不会浑浊，可排除污染，这些黑点有两个来源：细胞内的黑点是分泌泡，本身是透亮的，由于对焦折光的原因变成暗黑色，属于正常存在现象，但是会随着细胞状态变差而出现分泌泡增多；细胞间的黑点是死亡后的碎片残渣及细胞增殖过程中产生的代谢产物，

处理建议：用PBS可以把大部分清理掉。如果PBS清洗后还是有较多附着在瓶底的残渣碎片，建议客户消化细胞转移到新的培养瓶培养。悬浮细胞可以900转3分钟离心，低速离心可以去除一部分死细胞，离心后细胞密度会降低，建议提高血清浓度调养。

复苏的条件没有掌握好会严重影响细胞状态的。