茜素红染色

会不会是染液没洗干净呢？我上一次是染出来褐色，也不知道什么原因

对照组也有染红，提示可能组织有钙质变化。

茜素红染色的步骤和注意要求：

1. 成骨诱导分化结束后，吸去六孔板中的成骨诱导分化完全培养基，用1×PBS轻柔洗涤2~3次。

2. 每孔加入2mL 4%多聚甲醛溶液（或10%福尔马林），室温固定30min。

3. 吸去固定液，用1×PBS轻柔洗涤2~3次，确保将固定液清洗彻底。

4. 每孔加入2mL茜素红工作液，室温染色5~10min。

5. 吸去茜素红染色液，用1×PBS轻柔洗涤2~3次，充分洗去多余染色液。

6. 每孔加入2mL 1×PBS，将培养板置于显微镜下观察成骨染色效果。

7. 染色后的六孔板用封口膜封装后，置于4℃可保存2周。

注意要点

对照组可能存在目标物质的污染所以有染色。