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成纤维细胞和平滑肌细胞做组化用什么marker区分呢,有无推荐?求助大佬们┭┮﹏┭┮
Eason老歌迷
可以考虑Vomentin,HsP47,S100A4,alpha smooth muscle actin。
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问
免疫组化过程中,DAB显色后发现切片着色不均匀,如一片着色,另一片不着色或染色浅?
Eason老歌迷
还是没有切好,组织切的不好,切片机的问题例如比较老的旧的机器切的厚或者不均匀,或者切片者手法不好等。
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救急,裸鼠皮肤出现什么问题了
bamboopiggy
感觉是小鼠的屁股不知道在什么地方磨过了。但是又左右对称,应该是就长这样吧。
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肺癌细胞造的转移模型,用什么抗体指标做免疫组化还是免疫荧光可以确定转移部位的细胞
你好几和户
F1,TTF1阳性代表的是肺来源,KI67是主要看增长指数,其他HER2,KRAS或者P53、CK都证明来源。
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问
CDX-Hep3B,有人做过吗?
bamboopiggy
hep3B是肝癌细胞系,可能这个细胞系促血管生成,所以成的瘤都是血,你需要换个细胞系做了。
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问
关于毒理学实验每组小鼠的数量的设置问题
bamboopiggy
是太少,一般要求每组最少要五只。
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问
学习睾丸网注射腺病毒,有做过的同学知道睾丸网注射的具体位置和技巧吗?
府宅
小鼠睾丸注射的实验步骤:1.麻醉小鼠:40-80mg/kg,注射时浓度一般为0.5%,腹腔注射。2.调节显微操作台的操作臂,将玻璃针尾部用打火机熏烤一下,装进操作臂内,旋好固定旋钮。3.小鼠昏迷后,用胶带固定四肢于硬纸板上。4.备皮:剪去小鼠腹部的毛。注意:剪下的毛妥善处理,勿污染小鼠腹腔。此步骤可不做5.开腹:逐层打开腹腔,表皮至肌层。6.将睾丸拉出腹腔:于膀胱旁边寻找与睾丸相连的脂肪垫,轻轻拖
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问
tunnel凋亡试剂盒的使用
balalaLy
tunnel跟你要染的一抗二抗是两个实验,一般做tunnel都会单独做,因为不好染,假阳性多,你再加染个一抗,步骤有多了,相互影响。及时一起染,也是先染一抗二抗,后面再染tunnel
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PBMC的CD107a检测方法
府宅
有些组织有自发荧光的,这会造成本底高
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抗原修复后DAB无显色
申东熙老伯
背景都没有片子都白了就是脱片。抗原修复结束一定要冷却。
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跑流式如何避免各通道之间的串色,防止串色的规则是什么
bamboopiggy
有的公司给了一张大海报,上面包括了所有抗体和颜色,你避免选择相近的就可以。
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问
流失检测中多marker时荧光抗体的选择及补偿调节,真的要被补偿整懵了,看了很多原理都懂,但是实际操作还是磕磕绊绊
Eason老歌迷
没事,慢慢来,我之前刚做的时候也不太懂,对于荧光补偿的确定,需运用以上补偿的基本原理并结合特定的标本来实现。以FITC,PE双色分析为例:(1)先调节阴性对照管:将原补偿清零,首先调节电压,通过调节电压,使阴性群落在FITC和PE双阴性区。(2)FITC单染管:在理想情况下(没有荧光干扰),因检测管中不应该出现PE信号,但实际情况是在FITC与PE的双阳性区出现了荧光信号。这个信号就是PE探测器检
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为什么IHC中用过氧化氢可以失活内源性过氧化氢酶
冷泉港蛋白
1.过量的过氧化氢3%,会氧化酶活中心具有还原性侧链的氨基酸,有半胱氨酸 天冬酰胺,还有一个,这样就无法形成中间态了。酶就失活了。而且是不可逆的,形成了共价键。2.DAB显色也用过氧化氢啊?其浓度是0.03%,一百倍的差别。当然也会修饰还原性侧链,概率比较低了。3.3%的过氧化氢会修饰过氧化氢酶,当然也会修饰所要检测的抗原,这种修饰对氨基酸侧链的改变比较小;修饰的还原性侧链不一定是抗体所对的表位。
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MyD88抑制剂TJ-M201
Eason老歌迷
如果你刚开始做,我建议你做几次预实验,探索一下这个试剂的用量,做一个cck8看看最适浓度,然后你如果想偷懒,我可以给你分享一篇最近刚看的文献“新型MyD88抑制剂及其在脓毒血症中的应用”,一篇老文章。
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求助:为什么肺损伤模型小鼠体重一直下降?
麻黄连翘赤小豆
小鼠体重太轻了,耐受性降低,损伤模型就是会掉体重,术后的护理也很重要
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flox/flox小鼠与KO小鼠有什么区别啊
MercyHuang
flox的意思是 flanked loxP,意思是在目的基因片段的两侧各放一个loxP位点。通常,这两个loxP位点同向排列,位于某一个外显子或者某几个连续的外显子两侧的内含子序列中。如此,由于mRNA成熟时拼接掉内含子,插入内含子中的loxP是不影响基因正常表达的。但是一但和携带Cre的小鼠品系交配,Cre蛋白表达的细胞中,Cre会识别两个loxP,并最终导致两个loxP位点之间的序列被删除。如
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【求助】小鼠肝脏切片免疫组化染色见大量胞内异常空泡,是细胞核着色不均吗?
Eason老歌迷
可能是细胞水肿,肝脏细胞是比较规则的,你这个不规则了。一般出现圆形空洞,是脂滴浸入有机溶剂溶解后留下的空泡,你这个图我不确定。另外,你的苏木素和伊红都没染出来效果,核应该是蓝色的,然后仔细看有的肝细胞是多核的,细胞浆是粉红色的。
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脓毒症造模成功标准?
你好几和户
一感染因素最好以感染灶、创面感染或内源性感染的形式出现.以模拟人类感染引起---系列病理生理反应的自然过程;二发病过程中血细菌培养及内毒素检测为阳性;三MODS发生距原发打击有一定的时间;四有明显的脓毒症表现,呈现高动力循环状态和持续高代谢反应;五有足够的死亡率和MODS发病率。
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免疫组化的实验阳性很弱怎么办?
bamboopiggy
可以尝试增加一抗浓度,最好能加一个阳性对照。
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免疫组化实验显色后必须要进行苏木素复染吗?
向日葵需要大太阳
这个是常规染色,苏木素染核更好得观察蛋白的表达位置,当然你也可以不染,但是呈现出来效果不太好
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