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        为什么IHC中用过氧化氢可以失活内源性过氧化氢酶

        相关实验:小鼠脑片免疫组织化学(ABC 法)实验

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        dxy_6vg3jtu7

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        3 个回答

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        冷泉港蛋白

        有帮助

        1.过量的过氧化氢3%,会氧化酶活中心具有还原性侧链的氨基酸,有半胱氨酸 天冬酰胺,还有一个,这样就无法形成中间态了。酶就失活了。而且是不可逆的,形成了共价键。

        2.DAB显色也用过氧化氢啊?其浓度是0.03%,一百倍的差别。当然也会修饰还原性侧链,概率比较低了。

        3.3%的过氧化氢会修饰过氧化氢酶,当然也会修饰所要检测的抗原,这种修饰对氨基酸侧链的改变比较小;修饰的还原性侧链不一定是抗体所对的表位。

        4.如果抗体表位还原性氨基酸比较多,高浓度的过氧化氢处理就不合适了。需要调整处理的浓度和时间。

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        你好几和户

        有帮助

        过氧化物酶本身的底物不是过氧化物,而是蛋白质!!!

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        dxy_6vg3jtu7user-title

        那其他的蛋白质不会变性吗

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        Eason老歌迷

        有帮助

        主要还是过氧化氢可以使蛋白失活,过氧化物酶的本质是蛋白质,H2O2的氧化性会使蛋白质变性。

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        dxy_6vg3jtu7user-title

        那这样不是会对我们的目标蛋白也存在失活的情况吗,从而失去与一抗的能力,甚至于使组织内的大多数蛋白都失活呢?

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