实验问答21,935,603 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问流式、共聚焦两个实验结果不一致

Dr_劉医生

两个实验结果不一致，可能是由于以下原因导致的：1. 样品制备不同；2. 实验条件不同；3. 数据分析方法不同；4. 仪器故障等。

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问大鼠幽门结扎后怎么取出胃液测定胃蛋白酶啊

dxy_n60rfk55

博主解决了吗？直接抽取胃液的吗？同问！！

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问whole mount免疫荧光染色抗体孵育时3D细胞团散了

loveliufudan

下面是一些可能的原因：固定过程中使用的PFA浓度或固定时间过长可能会导致细胞球破裂。你使用了4%的PFA，这个浓度对于不同的细胞类型可能有不同的影响，过浓的PFA浓度或固定时间过长可能会破坏细胞膜，导致细胞球破裂。建议使用更低浓度的PFA，比如1% PFA，在更短时间内固定细胞。梯度转移过程中可能会出现问题。转移到MeOH中的过程可能会导致细胞球破裂。此外，转移到PBS的过程中，可能出现过度搅拌或

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问鸟类血液中的血浆与血细胞的离心，转速应该用多少呀？时长多少呢？

loveliufudan

对于鸟类血液，根据常规操作经验，一般建议离心转速在2000-3000g之间，时间在10-15分钟，这样可以较好地分离血浆和血细胞。但是不同种类的鸟类血液的离心条件可能会有所不同，需要根据实际情况进行优化。对于你描述的操作，离心转速和时间可能过高，导致血细胞被过度离心，破坏了血细胞结构，无法得到理想的血细胞样本。建议你在进行血液离心的时候，首先需要了解血液样本的具体特征，根据样本的特征和需要分离的成

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问您好，想测大脑PAG区的免疫组化，切片应如何切，按照哪个方向切呢

loveliufudan

通常情况下，进行PAG区免疫组化的切片方向是冠状面（coronal section），即从前向后切割大脑组织。在进行冠状面切片时，需要先将大脑取出，将其冷冻或用固定液固定，并进行切片。每个切片的厚度一般为20-50微米，取决于研究的需要。切片的位置应该包括PAG区，即位于中脑背侧，与四联体（tectum）和中央灰质（central gray matter）相邻的区域。

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问想请问大家，尾静脉注射一天最大量是多少啊

此用户已注销

尾静脉注射:100μl/只,注射量不可超过, 也不可注射入空气,以免造成小鼠的死亡

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问大鼠灌胃后，弄成湿罗音了咋办

土井挞克树

考虑是一次灌胃的液体量太大了，可以减少灌胃的液体量

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问有哪位大佬可以让我加下联系方式嘛？我想请求下盆腔炎大鼠造模经验和一些小细节？非常感谢🙏

Dr_劉医生

【慢性盆腔炎大鼠造模方法】1、动物和菌液 Wistar 大鼠。麻醉用品(如戊巴比妥钠),细菌悬液(大肠杆榭、金黄色葡萄球菌,溶血性链球菌按 2t1：1 混合,用元菌盐水稀释,浓度为 30 亿/ml混合菌)或大肠杆菌液。2、模型制备用戊巴比妥钠(50mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,在无菌条件下,取下腹部正中切口长约 0.8～1cm,开腹后暴露寻找大鼠双角子宫,在双角子宫分叉处进针,先物理损伤子宫内膜

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问小鼠模型批次效应

Dr_劉医生

小鼠批次基本不会影响，影响的是小鼠品系类型，用稳定的杂交品系小鼠做敲除小鼠即可。小黑鼠用C57BL/6，小白鼠用BALB/c

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问【求助】氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）

loveliufudan

有以下几点建议：在精密培养箱进行实验时，建议打开96孔板的盖子。因为在密闭的条件下，细胞间的气体交换会受到限制，可能影响细胞生长和实验结果。但是，在操作过程中要保持无菌操作的规范，避免污染。OGD/R（oxygen-glucose deprivation/reoxygenation）模型确实会导致一部分细胞死亡，但也可能有一部分细胞存活。CCK-8方法主要用于评估细胞存活率，因此您可以继续使用CC

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问求助| 请问图中有小鼠小肠隐窝细胞吗？最近在做类器官培养，总是分离不出隐窝

loveliufudan

如果您正在尝试分离小肠隐窝细胞以进行类器官培养，以下是一些可能有用的建议：1.使用适当的消化酶：小肠隐窝细胞位于上皮层基底部，因此需要消化酶渗透到上皮层下面。试着使用适当浓度和时间的消化酶，以获得更好的细胞分离。2.优化组织分离条件：能够获得更好的细胞分离的关键是优化组织分离条件，这可能包括不同的消化酶浓度，消化时间，温度和机械强度。3.选择适当的分离方法：不同的分离方法适用于不同类型的细胞。

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问哪位大佬有盆腔炎大鼠造模的视频？非常感谢！在线求学习！

土井挞克树

这里没法发视频，给你发造模方法吧细菌悬液注射造模法【造模机制】人类慢性盆腔炎绝大多数为细菌感染所致,其中大肠杆菌在其发病中为主要病原微生物,病变多为单侧或一侧轻一侧重,且慢性盆腔炎患者多数有宫腔操作史。【造模方法】1、动物和菌液 Wistar 大鼠。麻醉用品(如戊巴比妥钠),细菌悬液(大肠杆榭、金黄色葡萄球菌,溶血性链球菌按 2t1：1 混合,用元菌盐水稀释,浓度为 30 亿/ml混合菌)或大肠杆

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问对于做盆腔炎大鼠的课题实验研究难嘛？后续的论文好发sci嘛？

土井挞克树

实验难度中等水平，后续还是比较好发文章的

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问药效学本来就是主观性很强吗？

loveliufudan

对于实验中存在的问题，如您所提到的40只鼠只有10只被选择为实验组，剩下30只被分为对照组，可能会存在潜在的偏见和干扰。这种情况下，可以通过增加实验动物数量、进行多次实验或者使用更严格的随机分组和盲法操作，来减少偏见和误差的影响，提高实验结果的可靠性。

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问做动物植皮实验大鼠如何取中厚皮，取皮后供皮区如何处理？

sswei

应用取皮鼓切取0.3--0.45mm厚度以及相应面积大小的皮片。

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问盆腔炎大鼠造模需要手术嘛？用到哪些细菌？有没有哪些注意事项。本人小白，有大神或者前辈能讲一些细节嘛，万分感谢

loveliufudan

在动物模型中，盆腔炎可以通过给大鼠注射细菌来造成。下面是造模需要注意的细节：手术：盆腔炎大鼠造模需要进行手术，手术需要在无菌条件下进行。在手术前，需要将大鼠进行禁食和水，以减少手术过程中的胃内容物和膀胱液的污染。在手术过程中需要注意保持手术器械、手术区域的无菌状态，以避免细菌污染。细菌：盆腔炎大鼠造模需要使用盆腔炎相关的细菌。可以使用已知的盆腔炎病原细菌，例如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等，也可以使用

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问做动物实验时怎么脱毛？有什么高效彻底的方法吗？

sswei

可采用以下方法1. 剪毛法紧贴动物皮肤，按序将被毛剪去。注意千万不能用手提起被毛剪，以免剪破皮肤。剪取时，应逆着毛发的方向剪取。 2. 拔毛法家兔耳缘静脉注射或采血时最常用。将家兔固定后，用拇指和食指将所需部位的被毛拔除，涂上 70%酒精消毒后，可清楚地显示血管。3. 剃毛法电动剃刀（电推子）：须逆毛方向剃毛刮胡刀（刮胡刀片）：先用

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问盆腔炎大鼠和卵巢早衰大鼠哪个更容易造模，可行性强点？

Dr_劉医生

肯定是盆腔炎大鼠模型，用LPS诱导炎症发生即可，卵巢早衰的模型表型验证比较麻烦

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问动物实验大鼠二度、三度烧伤创面如何造模？

loveliufudan

1.准备实验器材：需要准备实验所需的大鼠、手术器械、热源等。可以选择使用热水、金属板等作为热源，其中金属板可以提供更加精确的热控制。2.麻醉大鼠：使用适当的麻醉药物将大鼠麻醉，确保大鼠处于无痛觉状态。3.制备创面区域：根据实验需要，选择在大鼠的背部或侧面制备烧伤创面。首先将创面区域的皮毛剃除或剪短，然后用清洁剂或酒精消毒。4.准备热源：将热水或金属板加热至适当温度。根据需要制造二度或三度烧伤，可设

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问HE染色封片后能重染吗?

sswei

已经HE染色封片后的组织一般不能再进行染色，因为封片的过程会将组织固定在了载玻片上，使其不再具有活性，无法进行染色反应。

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