流式、共聚焦两个实验结果不一致

两个实验结果不一致，可能是由于以下原因导致的：1. 样品制备不同；2. 实验条件不同；3. 数据分析方法不同；4. 仪器故障等。

出现流式细胞术和共聚焦显微镜观察抗体结合强度不一致的结果可能是由以下因素引起的：

1. 抗体选择和浓度：不同的抗体对特定目标的结合能力可能有所不同。在流式细胞术中，抗体可能被大量添加并与细胞混合，从而增加了结合信号的强度。而在共聚焦显微镜观察中，抗体的浓度可能较低，且细胞与抗体的接触时间相对较短，因此结合信号可能较弱。

2. 细胞固定和渗透性：共聚焦显微镜观察通常需要对细胞进行固定和渗透化处理。这些处理可能会导致细胞膜的破裂、抗体的渗透和流失，从而降低抗体结合的强度。

3. 抗体结合位点的可达性：抗体与特定抗原结合的能力可能受到细胞固定和渗透性处理的影响。某些抗体的结合位点可能在细胞固定和渗透性处理后变得不可达，导致结合信号减弱。

4. 光学分辨率限制：共聚焦显微镜的分辨率相对较高，可以观察细胞内的亚细胞结构。但是，如果抗体结合的区域位于细胞内的亚细胞结构中，光学分辨率可能不足以准确显示抗体结合的强度。

共聚焦的分辨率要高一些，所以考虑是流式结果可能存在偏差，建议提高抗体的荧光结合特异度然后重跑一遍流式