明胶酶谱
知识海洋的一滴水
有没有跑明胶酶谱的大神，实验磕了三周了 还是没有一点效果。
没有一点条带，可能导致灭活事项都有注意，制样不加DTT、贝塔-me，不加热
4℃冷库电泳，12%的胶跑10mA的电流
复性
用的是2.5% 的Triton X-100清洗4℃ 摇床 30min/2次
孵育
先用孵育液（20mM Tris-Hcl pH7.5 10毫摩尔氯化钙 1微摩尔氯化锌）室温摇床15min
在加新的孵育液37℃ 18h
染色用考马斯R-250的染液染色40min
大致流程是这样
还有那些注意事项 望大神指点
2 个回答
huarenqiang5
有帮助
可能是电泳操作不对，配胶不均，温度控制不当等。
土井挞克树
有帮助
孵育时间不够。由于某些样本活性太低，孵育时间不够，很难出现条带。
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