想通过双荧光霉素活性验证转录因子对启动子的影响，应该怎么转染进293T中。

首先要弄清楚转录因子和启动子结合的区域在哪里，为了验证转录因子对启动子的活性，我们常见的是构建pGL3质粒，将启动子序列片段加载到质粒当中，然后和293T一般共培养，在此过程中需要添加转录因子的分子模拟物

把启动子的序列克隆到pGL3的质粒上，然后把转录 因子克隆到另外一个载体上，共转感染293，测荧光素酶的活性。

把你感兴趣基因的5'启动子区克隆在荧光素酶的上游，或把3'-UTR区克隆在荧光素酶的下游等，构建成报告基因(reporter gene)质粒。.然后与转录因子表达质粒，或miRNA mimics共转染细胞，裂解细胞，测定荧光素酶活性。