转录因子活性ELISA

转录因子活性 ELISA

 

    转录 因子活性ELISA是建立在ELISA基础上的高灵敏度的检测方法，比EMSA的灵敏度高l0倍，在5h内就能完成。不涉及放射性和凝胶电泳，安全简便，而且这种微孔板的形式能同时检测1―96个样品。ArrayStarTM转录因子活性ELISA试剂盒可以快速、灵敏地检测细胞核提取物中转录因子的DNA结合活性。试剂盒采用96微孔板的形式，标记探针是生物素标记的双链寡核甘酸片断，含有转录因子的特异性DNA结合序列。当标记探针与细胞核抽提物一起孵育时，核抽提物中有活性的转录因子与探针特异性结合形成转录因子／探针复合物。随后转录因子／探针复合物与链亲和素包被的微孔板孵育，转录因子／探针复合物通过与微孔板上链亲和素结合，被固定在微孔板上。洗去未结合物，加入特异性一抗，然后加入HRP标记的二抗及底物，HRP催化底物发生颜色改变。转录因子活性ELISA检测方法也是利用转录因子的DNA结合功能，但与传统方法不同的是，它是利用抗体进行检测，不需要使用放射性和电泳，根据颜色的变化，就能够安全地检测特定的转录因子活性改变。

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