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        第二抗体欧联物进行免疫检测

        相关实验:免疫印迹与免疫检测实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.  将膜放入可热密封的塑料袋,加5 ml 封闭液,密封塑料袋,在旋转摇床或摆动平台中摇动30~60 min。
         
        2.  用封闭液稀释第一抗体(取决于抗体和检测系统,以1:10~1:100 000稀释)。

        3.  打开袋子,倾去封阻液,以稀释的第一抗体工倾代替之。在室温下持续摇动30~60 min。

        4.  带着手套从塑料袋子中取出膜,放在塑料盒子中摇动着用200 ml TTBS(硝酸纤维素膜或PVDF膜)或TBS(尼龙膜)洗4次,每次10~15 min。

        5.  用封闭液稀释HRPO或AP抗Ig抗体偶联物。
         
        6.  将膜放进一新的可密封塑料袋子,加入稀释的HRPO抗Ig抗体偶联物。在室温持续揺动30~60 min。

        7.  从塑料袋中取出膜,并按步骤4冼膜,按合适的显迹方法处理膜。

        来源:丁香实验

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