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        请问明明BCA定量完了,为什么每次跑出来的GAPDH都不齐呢?还有其他蛋白归一化的方法吗?

        相关实验:免疫印迹与免疫检测实验

        user-title

        dxy_i1c22c8w

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        3 个回答

        user-title

        今天摆烂了咩

        有帮助

        可能因为BCA测定的是组织内总蛋白的量,组织内细胞类型较多的话,测定的某一特定蛋白的浓度会不准确,可以根据各条带的灰度调整下上样量,即调下内参试试。蛋白浓度测定除了BCA法外还有紫外吸收法,双缩脲法,考马斯亮蓝法等等。

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        如果内参没有选择错误,而只是内参不齐的话,那说明你的蛋白定量有问题,只需要根据内参的IOD做一下上样量的调整就可以了。

        user-title

        府宅

        有帮助

        GAPDH不齐会不会是loading的体积没有加上或蛋白降解也有可能的,最好免疫印迹前定量,转膜或显影不齐后有没有适当自己调整上样量,有时我定量后也不太齐就自己调整下体积。

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