• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        求助!!用ova蛋白做SDS-PAGE跑不出条带是什么情况

        相关实验:免疫组织化染色

        user-title

        布里啾啾迪布利多83AQ

        各位大佬,请问大家有做过用ova跑SDS-PAGE蛋白电泳的实验吗

        我是用的12%的分离胶,ova蛋白的浓度分别从1 mg/ml然后依次2倍稀释。结果跑出来的胶除了能看见Marker之外,ova蛋白条带一条都没有……这是什么情况啊,ova蛋白跑电泳有什么注意事项嘛请大家帮帮忙!!

        wx-share
        分享

        4 个回答

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        也不太可能一条都没有,是不是你操作过程中蛋白降解了

        user-title

        布里啾啾迪布利多83AQuser-title

        但是我的蛋白是现用现配的 而且一直放在冰盒里面

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        ova的分子量是45KD,一般不会跑不出来啊,你考染胶看看,如果考染能看到条带,就是你的抗体有问题了。

        user-title

        布里啾啾迪布利多83AQuser-title

        我就是考染之后看不到条带的 没有做western

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        最好用蛋白浓度高一点,确保蛋白量是够的,再来摸索抗体的条件。

        user-title

        布里啾啾迪布利多83AQuser-title

        好的,感谢!但是我蛋白的浓度做到了1 mg/ml,上样量是 十微升左右,这种情况下蛋白用量应该是够的呀

        user-title

        你好几和户

        有帮助

        可能是你转膜及转膜之后的操作、试剂发生了问题。比如说你转膜的三明治没做好,转膜的电压太高,没有冰盒散热导致条带弥散,以及之后你的一抗、二抗有问题。如果是根据marker在胶上看,那我觉的你应该坚持做到最后显影、压片再说。

        user-title

        布里啾啾迪布利多83AQuser-title

        umm我就是简单的用ova跑个蛋白电泳,不做蛋白免疫印迹 正常的话考染之后是能看见条带的,我跑其他的蛋白都有,就是ova跑不出来

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序