鲨鱼甜椒
请问有朋友用NPN检测过大肠杆菌外膜通透性吗?我这几天做了几次,用95%乙醇溶解的NPN,加到大肠杆菌悬液里,测出来的荧光值和对照组没差异,而且随着时间延长,荧光值会降低很多。请问是我的溶剂不对嘛?
vlinine
不一定就是溶剂的问题,也有可能是大肠杆菌悬液的溶度问题。
Dr_劉医生
应该不是溶剂的问题,NPN是一种荧光染料,在水溶液条件下npn染料会发生荧光淬灭,而在疏水条件下会发出强烈的荧光。其化学本质就是不溶于水,易溶于乙醇、乙醚、丙酮等溶剂,这个说明书里也会有说明;因此,实验组和对照组荧光值没差异是否是大肠杆菌悬液的溶度问题。
Eason老歌迷
是不是因为疏水性荧光试剂NPN 在水溶液中的荧光强度很低,一旦到达细胞外膜的疏水性环境中,它的荧光值便会激增。如果细胞外膜发生严重瓦解,生物膜结构遭到破坏,NPN 将无法进入疏水性环境,从而导致NPN 的荧光吸收值下降。而且据说5%乙醇也会杀菌。
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