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        wb如何才能把内参蛋白条带跑直?

        相关实验:免疫印迹与免疫检测实验

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        dxy_ql1mdxm

        wb如何才能把内参蛋白条带跑直?

        wx-share
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        3 个回答

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        1.分离好蛋白上清,在加Loading buffer,ddH2O前药先把金属浴仪器打开,使其尽快达到预定温度。然后快速于每个蛋白样品中加入LB和水。这样可防止蛋白的继续降解。

        2.蛋白上样时,样品要混匀,特别是做CO-IP实验蛋白样品中含珠子的一定要充分混匀

        3.药物或其他外界因素:使用影响围观蛋白的药物作用细胞,如长春新碱、紫杉醇等不要用tubulin蛋白;在做缺氧相关实验时不要用GAPDH;有些药物导致细胞生长发生改变时尽量避免使用actin。

        user-title

        府宅

        有帮助

        (1)抗体:一抗用过3次往后就不要用了,直接换新的。

        (2)转膜时(湿法或半干转法),特别是半干转法,务必保证上下层滤纸充分浸泡在转膜液中,使之达到饱和。

        (3)上样时要保证各组蛋白浓度一致,同体积或同质量。

        user-title

        今天摆烂了咩

        有帮助

        要跑出完美的内参条带,可以注意以下几点

        1.小心上样,避免加到槽外,上样时候保证各组蛋白浓度一致,且样品要混匀

        2.转膜时充分浸泡转膜液,充分驱赶气泡

        3.及时更换抗体

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