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        啦啦158236

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        3 个回答

        user-title

        府宅

        有帮助

        1. 抗体浓度过高,洗涤不充分。
        2. 封闭不充分。
        3. 使用了不恰当的封闭剂,可尝试不同的封闭剂。
        4. 曝光过度。
        5. 操作过程中膜干了。
        6.发光液质量问题。

        user-title

        JoeVONL

        有帮助

        第二个问题:1.抗体浓度过低或抗体失效-增加抗体浓度、换用别的抗体并设置阳性对照;2.样品中目的蛋白表达量低-增加蛋白上样量;3.曝光时间过短或者发光液过期-增加曝光时间、换用新曝光液;4.蛋白未转到膜上-用预染marker或者丽春红评估转膜效率,考虑是否是转膜条件的问题

        user-title

        小布丁瑶瑶

        有帮助

        膜封闭不够——延长封闭的时间;选择更加适合的封闭液。一抗稀释度不适宜——对抗体进行滴度测试,选择zui适宜的抗体稀释度。一抗孵育的温度偏高——建议4℃结合过。膜在实验过程中干过——实验过程中要注意保持膜的湿润。检测时曝光时间过长——减少曝光时间。

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