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问
免疫组化:出现切片边缘着色的现象,可能是什么原因导致的?我应该怎么避免呢?
府宅
切片上滴加的试剂未充分覆盖组织,边缘的试剂容易首先变干,浓度较中心组织高而致染色深。试剂要充分覆盖组织,尽量避免选用坏死较多的组织。
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问
做乳腺组织的免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜看很好,有阳性信号,但是拿到荧光镜下看,我的阴性对照一片绿,像非特异性染色,哪个是真的
whilt-shirt
有可能是荧光显微镜波长不太对,以共聚焦为准
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问
免疫荧光实验结果在采集图像时,对图像加上标尺,为什么半定量分析时原始图像不佳
bamboopiggy
其实,你用ps加标尺会更好一些。但是加不加标尺和你半定量分析没关系,可能是你存的图片的格式是jpeg,而不是tiff的原因。
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问
免疫荧光做DAPI染细胞核时,加入的试剂太多,造成高背景染色,怎么确定DAPI的合适量
bamboopiggy
我直接买的现成的带dapi的固态封片剂,一般就不会那么多了。要不你就要自己摸一个浓度,然后每次染了去看。
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问
做免疫荧光实验,用组织切片和培养细胞的样本,这两者对结果有什么影响
飘雨4666
对结果影响不大,二者染色方法一样,只是固定方法不同而已,细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛
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问
免疫荧光所用的玻璃片可以使用紫外灭菌吗
你好几和户
如果是有标本玻璃片肯定是不可以的,会干扰,因为荧光抗体与标本中的抗原发生特异性结合,在荧光显微镜的蓝紫光或紫外光照射下,标本中的抗原抗体复合物便发出特异的荧光。
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问
巨噬细胞炎症模型
Dr_劉医生
做过ASCVD内皮功能查过相关的资料,大部分都是直接购买的RAW 264.7巨噬细胞系,借楼上国内很多都是用LPS诱导;附上几篇中文参考文献可以去参考,刘文强,张懿玲,熊华,朱雪梅,孙永.基于LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞炎症模型的榴莲壳多酚抗炎作用及其分子机制[J].食品与机械,2020,36(04):15-20+50.DOI:10.13652/j.issn.1003-5788.2020.
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问
想请教一下人皮肤成纤维细胞HDF,HFB,HSF等细胞之间的区别是什么
此用户已注销
细胞的特性还有活性不同、还有结构
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问
IHC求助|小鼠4T1肿瘤组织染不出CD8
麻黄连翘赤小豆
如果染不出来可能还是抗原修复的问题或者封闭的问题,组织固定时间太短也可能导致抗原分解或者弥散
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问
抑菌实验
此用户已注销
最好是需要的、具体的要知道某种菌悬液浓度的方法:首先,取一定量菌悬液,测定其OD值,然后稀释100倍-1000倍,然后培养基培养,数其中的CFU数,换算成相应的浓度。然后根据这些数据来换算1-9×104对应的OD值是多少,下次培养到相应的OD值就行了,具体多久就要根据你的生长曲线来了。
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问
组织放在4%的多聚甲醛中保存放在-20度保存2个月,还能用吗?
府宅
使用4%的多聚甲醛可以固定标本不能超过48h,固定时间太久组织会变脆如果是在温度4°以下最多可以放一个月,但是肯定会损失抗原的
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问
求助:细胞免疫化学实验抗体的问题?
bamboopiggy
一般不用enhacer,加了这个容易出假阳性
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307 围观
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问
免疫荧光:为什么细胞核周围总是存在有一些蓝色的小点点?
麻黄连翘赤小豆
可能是泛染了,封闭的时候需要山羊血清等你会好一些
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问
免疫荧光:视野中细胞与细胞之间存在散在的发光点的原因有哪些?
dxy_gwrp7ndq
PBS 未过滤,未溶解的残渣黏附而导致
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问
求助关于免疫实验抗原的问题?
此用户已注销
由于组织在甲醛或多聚甲醛在固定中,发生蛋白之间交联及醛基的封闭作用,从而掩盖抗原决定簇。通过抗原修复,使得细胞内抗原决定簇重新暴露,提高抗原检测率,常用方法通常使用高压加热修复,使用高压加热修复对修复温度和时间的把握十分重要,温度越高修复时间越短,温度与修复时间呈负相关。修复结束后注意室温冷却,让蛋白自然复性。另外,大家尽量使用过量的抗原修复液,防止高温液体挥发干涸,对切片造成不可逆影响。
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问
组织样本无法及时进行免疫组化实验,怎么保存最好?
whilt-shirt
可以用组织保存液放-80保存。
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问
免疫荧光染色,非特异性染色太高,怎么解决呢?
balalaLy
封闭用好一点的封闭液,设置不加一抗的阴性对照,确保拍照的参数一致
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699 围观
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问
对于多色免疫荧光,是同时孵一抗,然后同时孵二抗,还是分开孵育?
whilt-shirt
一般是分开敷育的,这样效果会好一些
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3519 围观
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问
只要是荧光抗体就可以⽤于共聚焦显微镜吗?
guofei11227
是的,有荧光抗体就可以用于共聚焦显微镜
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问
用流式做免疫表型分析不能立即分析,可以用甲醛固定后放冰箱过几天再染色上机吗?
Eason老歌迷
如果不能及时上机检测,可将已经染色的细胞在1-4%的多聚甲醛中4℃固定30min,清洗细胞,之后用适量的Stain Buffer重悬细胞,4℃避光保存。固定的细胞需要尽快上机检测一般不应超过72h。
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