免疫荧光做DAPI染细胞核时，加入的试剂太多，造成高背景染色，怎么确定DAPI的合适量

我直接买的现成的带dapi的固态封片剂，一般就不会那么多了。要不你就要自己摸一个浓度，然后每次染了去看。

现在都是使用的防荧光衰减DAPI试剂，使用时滴上一滴就能将细胞核标记。因此，滴加的DAPI不要太多，只需覆盖上薄薄一层就行。DAPI溶液一般使用：ddH2O配制，溶液的浓度为 5mg/ml，推荐DAPI溶液工作浓度为0.5-10μg/ml之间。

这种情况可以设一下浓度梯度试试

防荧光衰减的DAPI试剂，使用时滴上一滴就能将细胞核标记，但滴加的量太多时，会造成整张图像呈现出蓝色的背景。因此，滴加的DAPI不要太多，只需覆盖上薄薄的一层即可。