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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
有做THP-1巨噬细胞M2极化成功的吗?
huarenqiang5
可以按以下步骤进行: 1、THP-1-M0 巨噬细胞分化 将THP-1 细胞按1×106~2×106个/mL 密度接种于完全培养基中,置于37 ℃、5%CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养,每2~3 d 换液。分别用50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L PMA 刺激THP-1 细胞48 h,诱导转化为M0型巨噬细胞,每组设置3个复孔,倒置相差显微镜下观察THP-1
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问
求助免疫电镜
loveliufudan
免疫电镜是一种结合免疫学和电子显微镜技术的方法,用于检测细胞或组织中的特定蛋白质或抗原。以下是一般的免疫电镜步骤:制备样品:样品可以是细胞或组织,需要进行固定和包埋处理。固定通常使用戊二醛或氧化亚铊等交联剂。包埋处理通常使用树脂,如Epon或Araldite。切片:用超薄切片机将包埋样品切成70-100纳米的薄片,然后将其放在电镜网格上。抗体标记:将特定的抗体与金颗粒等标记物结合。抗体可以是单克隆
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问
细胞实验,脂多糖LPS的配置
sswei
LPS可溶于水中(5 mg/ml),或是细胞培养基中(1 mg/ml)。LPS分子在任何溶液中都会形成微粒。溶于水中或是磷酸盐缓冲液中形成混悬液。在有机溶剂也是一种混悬液。细胞培养时,将LPS溶于装有1 ml无菌平衡盐溶液或是细胞培养基的小管中,轻轻摇晃直至其完全溶解。再加入无菌平衡盐溶液或是培养基直至配成工作浓度的母液。1 mg/ml浓度的溶液可在2-8℃中稳定保存1月左右,分装后于-20℃中可
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酶标仪黑色96孔板
huarenqiang5
黑色的酶标板一般用于荧光检测。而不能同时测OD。
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问
石蜡切片制备请教,该如何处理样本?
sswei
将蜡温调至高石蜡熔点1-2°C浸泡,至次日包埋。或可以将固定后的样本停在75%或85%中时间长一点(根据自己的时间调整),后边的程序不用改变,这样对免疫组化和分子病理检测的影响相对较少。
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问
请问商品化长期储存在-20°的多聚甲醛对细胞进行固定时会因为时效导致浓度改变等问题,导致对细胞通透性
秋秋欣欣
不会,多聚甲醛在-20可以保存很久
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问
流式细胞仪是否能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少?
土井挞克树
可以用流式加荧光的方法做,荧光强度可以定量
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问
求问为什么我配10%SDS溶解不了 我是2g加20mL纯水,65℃加热一直无法溶解?
土井挞克树
增加温度,可能你的试验中杂质过多
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抗体的储存:把抗体往低温放了
土井挞克树
短期低温我们影响不大,时间长的话有可能变性
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腹水制备
土井挞克树
不建议,清洁级别是不承认的,你后续投稿都会受影响
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流式 肺组织巨噬细胞
土井挞克树
不一定完全用抗体圈出巨噬细胞才可以,得出比例经过计算也是可以成功的
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问
AML12细胞出现问题
loveliufudan
以下是一些可能的情况:细胞凋亡体:这些小亮点可能是细胞凋亡产生的凋亡体,通常为圆形或卵圆形的小颗粒,大小约为细胞核的1/3-1/2。如果这是细胞凋亡产生的凋亡体,那么它们的数量应该随着时间的推移而增加。细胞碎片:这些小亮点可能是细胞碎片,通常呈不规则形状,大小不一。细胞碎片通常是由于细胞膜破裂或细胞器受损而产生的,可能是由于细胞处理不当、细胞密度过高或过低等原因导致的。细胞包涵体:这些小亮点可能是
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一氧化氮检测
此用户已注销
血清(NO2 +NO3 ) 含量测定,国内有的单位采用金属镉还原法
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问
求离子凝胶法制备壳聚糖纳米颗粒的配方!(浓度,比例,PH之类的细节)
土井挞克树
配方: 0.9g壳聚糖溶解在1%v/v的乙酸溶液里,制备壳聚糖溶液,PH为4。将1.2g三聚磷酸钠溶解在100ml去离子水中制备TPP溶液。取20ml壳聚糖溶液放到烧杯中,500转速磁力搅拌,往壳聚糖溶液里逐滴加入TPP溶液共20ml,即壳聚糖溶液和TPP溶液体积比为1:1。发现在滴入TPP溶液时出现乳白色的小球,滴完之后继续磁力搅拌30min,得到很多乳白色或者透明的小球,以及一些絮状的乳白色沉
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问
中国免疫学杂志投稿咨询
汤姆卜丽波
送审了就等结果就可以了,在这期间也可以看看有没有其他合适的杂志
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问
小鼠颈总动脉
huarenqiang5
提供几张小鼠颈总动脉图片参考:
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问
请问大家这个图怎么讲解?
土井挞克树
两种物质的发展趋势是相似的,但是峰值前后不同。
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问
M0巨噬细胞诱导成M1型LPS要加多少呢?
土井挞克树
看你的lps浓度,如果是1mg/ml的话就需要稀释到10ug左右
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问
皮肤组织固定后脱水问题
汤姆卜丽波
你这个流程没问题,可以按照这个做个预实验看看效果,冲洗用pbs
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问
流式fc block可以用小鼠血清吗?
sswei
DC染色前可以用小鼠血液离心后的血清过滤作为封闭液,但是准确性和稳定性较流式fc block差些。
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