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coIP/抗原抗体过夜有沉淀/非特异
loveliufudan
您可以尝试以下几个方法:优化裂解液成分和pH值减少孵育时间和温度在加入磁珠前离心取上清,并且在加入磁珠后再次离心去除残留絮状物
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问
转录组分析
loveliufudan
如果你想要获取上调前20%的基因,你可以根据Log2FoldChange从大到小进行排序,然后取前20%的基因。例如:共有100个上调基因,对这些基因根据Log2FoldChange从大到小进行排序,然后取前20个基因。但是,仅仅根据Log2FoldChange来筛选差异表达基因可能不够准确,还需要考虑FDR(错误发现率)这个指标。FDR是通过对p值进行校正得到的,反映了差异表达分析中假阳性的概率
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求助,小鼠脾脏淋巴细胞的培养
loveliufudan
小鼠脾脏淋巴细胞分离后,需要在含有一定浓度的细胞因子的培养基中培养,以刺激细胞增殖和活化。其中,IL-2是一种重要的细胞因子,它可以促进T淋巴细胞(包括调节性T细胞和效应T细胞)的增殖和存活。因此,你可以在你的培养基中加入适量的IL-2(例如10 ng/mL),并在37°C下5% CO2条件下培养24小时或更长时间。另外,你还可以考虑加入其他一些细胞因子,如IL-4、IL-7、IL-15等,以增强
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求助!怎么检测自身反应性T细胞
sswei
T细胞上有绵羊红细胞受体,可形成E花环,E花结试验可用于计数T淋巴细胞。
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问
可以看见明显趋势但actin不齐可以用吗
balalaLy
应该不行,NC组的内参太糊了,跟过表达差异那么大,这种情况会被质疑你的转染本身对细胞有影响。建议调一下上样量再跑一次
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HIV胶体金试纸研发问题
huarenqiang5
主要考虑样本本身问题或PH值问题导致。
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问
有做THP-1巨噬细胞M2极化成功的吗?
huarenqiang5
可以按以下步骤进行: 1、THP-1-M0 巨噬细胞分化 将THP-1 细胞按1×106~2×106个/mL 密度接种于完全培养基中,置于37 ℃、5%CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养,每2~3 d 换液。分别用50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L PMA 刺激THP-1 细胞48 h,诱导转化为M0型巨噬细胞,每组设置3个复孔,倒置相差显微镜下观察THP-1
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问
求助免疫电镜
loveliufudan
免疫电镜是一种结合免疫学和电子显微镜技术的方法,用于检测细胞或组织中的特定蛋白质或抗原。以下是一般的免疫电镜步骤:制备样品:样品可以是细胞或组织,需要进行固定和包埋处理。固定通常使用戊二醛或氧化亚铊等交联剂。包埋处理通常使用树脂,如Epon或Araldite。切片:用超薄切片机将包埋样品切成70-100纳米的薄片,然后将其放在电镜网格上。抗体标记:将特定的抗体与金颗粒等标记物结合。抗体可以是单克隆
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细胞实验,脂多糖LPS的配置
sswei
LPS可溶于水中(5 mg/ml),或是细胞培养基中(1 mg/ml)。LPS分子在任何溶液中都会形成微粒。溶于水中或是磷酸盐缓冲液中形成混悬液。在有机溶剂也是一种混悬液。细胞培养时,将LPS溶于装有1 ml无菌平衡盐溶液或是细胞培养基的小管中,轻轻摇晃直至其完全溶解。再加入无菌平衡盐溶液或是培养基直至配成工作浓度的母液。1 mg/ml浓度的溶液可在2-8℃中稳定保存1月左右,分装后于-20℃中可
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酶标仪黑色96孔板
huarenqiang5
黑色的酶标板一般用于荧光检测。而不能同时测OD。
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石蜡切片制备请教,该如何处理样本?
sswei
将蜡温调至高石蜡熔点1-2°C浸泡,至次日包埋。或可以将固定后的样本停在75%或85%中时间长一点(根据自己的时间调整),后边的程序不用改变,这样对免疫组化和分子病理检测的影响相对较少。
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问
请问商品化长期储存在-20°的多聚甲醛对细胞进行固定时会因为时效导致浓度改变等问题,导致对细胞通透性
秋秋欣欣
不会,多聚甲醛在-20可以保存很久
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流式细胞仪是否能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少?
土井挞克树
可以用流式加荧光的方法做,荧光强度可以定量
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求问为什么我配10%SDS溶解不了 我是2g加20mL纯水,65℃加热一直无法溶解?
土井挞克树
增加温度,可能你的试验中杂质过多
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抗体的储存:把抗体往低温放了
土井挞克树
短期低温我们影响不大,时间长的话有可能变性
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腹水制备
土井挞克树
不建议,清洁级别是不承认的,你后续投稿都会受影响
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问
流式 肺组织巨噬细胞
土井挞克树
不一定完全用抗体圈出巨噬细胞才可以,得出比例经过计算也是可以成功的
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AML12细胞出现问题
loveliufudan
以下是一些可能的情况:细胞凋亡体:这些小亮点可能是细胞凋亡产生的凋亡体,通常为圆形或卵圆形的小颗粒,大小约为细胞核的1/3-1/2。如果这是细胞凋亡产生的凋亡体,那么它们的数量应该随着时间的推移而增加。细胞碎片:这些小亮点可能是细胞碎片,通常呈不规则形状,大小不一。细胞碎片通常是由于细胞膜破裂或细胞器受损而产生的,可能是由于细胞处理不当、细胞密度过高或过低等原因导致的。细胞包涵体:这些小亮点可能是
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一氧化氮检测
此用户已注销
血清(NO2 +NO3 ) 含量测定,国内有的单位采用金属镉还原法
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求离子凝胶法制备壳聚糖纳米颗粒的配方!(浓度,比例,PH之类的细节)
土井挞克树
配方: 0.9g壳聚糖溶解在1%v/v的乙酸溶液里,制备壳聚糖溶液,PH为4。将1.2g三聚磷酸钠溶解在100ml去离子水中制备TPP溶液。取20ml壳聚糖溶液放到烧杯中,500转速磁力搅拌,往壳聚糖溶液里逐滴加入TPP溶液共20ml,即壳聚糖溶液和TPP溶液体积比为1:1。发现在滴入TPP溶液时出现乳白色的小球,滴完之后继续磁力搅拌30min,得到很多乳白色或者透明的小球,以及一些絮状的乳白色沉
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