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免疫组化图片明明肉眼可见是增强的,但是Image J分析mean值却反而下降,这是为什么呀
土井挞克树
有可能是image的灰度值没有设置正确,image的参数设置错误就会出现相反的结果
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问
请问哪位大神有肠道HE染色的protocol?🙏
loveliufudan
以下是一般肠道HE染色的protocol,供参考:材料:1.肠道组织切片2.1%硫酸铁溶液3.0.5%氯化钡溶液4.酒精:70%、90%、95%和100%5.苏木精染色液6.伊红染色液7.脱水剂:丙酮和xylene8.封片剂步骤:1.将切片放入1%硫酸铁溶液中,浸泡5分钟,去除多余的溶液。2.将切片放入0.5%氯化钡溶液中,浸泡2-3分钟,去除多余的溶液。3.将切片置于70%乙醇中,浸泡5分钟,然
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问
aSMA抗体为什么染进核了?求助求助!
loveliufudan
如果您的aSMA染色显示出了细胞核的颜色,可能会有以下几种可能性:实验操作失误。例如,未完全去除细胞外的aSMA抗体,或者使用了与aSMA抗体交叉反应的抗体。染色效果异常。可能是染色试剂批次变异,或者是染色温度、时间等实验条件不恰当。样本细胞异质性。不同的细胞类型在染色效果上可能会存在差异,可能会导致aSMA染色在细胞核中出现颜色。
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问
想用受体拮抗剂处理细胞,如何证明受体拮抗剂使受体是去了活性?
loveliufudan
为了证明受体拮抗剂使受体失去活性,您可以使用以下方法:放射性配体结合实验(Radioligand binding assay):该方法可用于测量细胞膜受体的结合活性,利用放射性标记的配体与受体结合,通过测量剩余的未结合的配体来确定受体活性是否被抑制。使用受体拮抗剂处理细胞,如果受体失去活性,则绑定配体的数量会减少。細胞酶連結免疫吸附分析(Cell-based ELISA):该方法利用受体特异性抗体
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问
GPCR抗体药物的blocking实验
sswei
流式细胞术检测比放射性元素检查的灵敏度差,准确性低。
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问
求助!!!!!
loveliufudan
在运行PmTOR Western blot实验时,常用的marker有常规的蛋白质分子量标准品(如Rainbow™ 磷酸化标准品或PageRuler™ Prestained Protein Ladder等),以及PmTOR的两个磷酸化位点Ser2448和Ser2481。这些marker可以用来确定PmTOR蛋白在Western blot上的位置,并且可以用来验证实验条件是否正确。同时,还可以使用总
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问
免疫荧光细胞骨架没有染上,反而染到了细胞核是什么原因?
sswei
抗体质量问题,抗体特异性差所致。
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问
如何准确确定菌株里有没有某个基因
balalaLy
或许摇个菌液送测序最简单快捷了,
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问
悬浮细胞转染
土井挞克树
可能是存在样本降解出了这一个条带,或者其他杂质污染了。
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问
抗体动态性研究
土井挞克树
最有效的是质谱法和免疫印迹,可以区分不同抗体的动态性差异
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问
活化的caspase3切割完底物后自身会降解吗
土井挞克树
会被降解,但是一般建议外部添加,可以干净消耗。
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问
胞膜GABA受体染色
龙大人驾到
要观察GABA受体在胞浆和胞膜的分布,可以尝试以下几种实验设计:1. 免疫荧光染色:使用特异性的抗体标记GABA受体,在细胞水平下观察GABA受体在胞浆和胞膜的分布情况。可以使用荧光探针或荧光标记的抗体等方法进行检测。通过共聚焦显微镜等技术观察荧光信号的分布情况。2. 膜蛋白分离:使用细胞膜蛋白分离试剂盒等方法,将胞膜和胞浆分离。然后使用Western blot或免疫印迹等技术检测GABA受体在胞
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问
生物学转录组测序请教
土井挞克树
只能根据生鱼片的图形去找可变剪接符合大的那个转录组,如果想要确定必须要测序。
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问
关于Raw263.7巨噬细胞极化问题,加LPS后,如何判断诱导其向M1型极化成功了呢?
土井挞克树
需要加细胞因子,然后观察m1分泌蛋白的分泌情况判断
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问
WB蛋白在37到45范围内用哪个浓度的分离胶分离比较合适?
你猜猜乌鸦座
一般蛋白分子量在20-60kDa之间选12%的分离胶
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问
组织芯片做多重免疫荧光如何避免组织脱离?
土井挞克树
脱蜡前进行水化,可以防止组织脱离
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问
多重免疫荧光为什么会飞片?
loveliufudan
造成多重免疫荧光飞片的原因有以下几个方面:治疗组织不当:在制备组织样本时,固定和处理组织的方法和条件可能会影响组织的完整性。如果组织未能充分固定或处理不当,组织结构会受到破坏,导致组织容易脱落。贴片不当:在贴片时,如果载玻片上的组织样本未能均匀涂布或压实,样本就会容易脱落。此外,如果载玻片表面存在污染或未经适当处理,组织样本的附着力也会受到影响。洗涤和染色条件不当:在染色和洗涤过程中,如果使用过于
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问
感受态细胞转化时,热激时间可以引导入的DNA大小进行调整么?还是在60秒到90秒就可以
龙大人驾到
感受态细胞转化时,热冲击的时间是非常重要的,它能影响DNA片段的渗透和稳定性,从而影响到细胞转化效率。一般来说,热冲击的时间应该在60秒至90秒之间。这个时间范围内,热冲击可以促进DNA片段的进入细胞,但如果时间过久,则有可能导致DNA片段的降解和稳定性下降,从而对细胞转化效率造成不良影响。此外,DNA的大小也会影响细胞转化效率,较小的DNA片段通常比较容易进入细胞并被稳定地表达。因此,在进行感受
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问
FITC-Dextran做抗原吞噬细胞的原理是什么呀
土井挞克树
FITC-Dextran具有抗原呈递功能,还可以被特异性识别。
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问
有哪些数据库记载了IG基因家族的详细分类分类与功能?
土井挞克树
IMGT,国际免疫遗传学数据库,这个数据库可以查询
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