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实验问答23,368,817 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

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问质谱成像目前的科研应用与转化情况

sswei

在临床研究中，大约85%的MALDI成像与癌症研究有关，其它15%的MALDI临床研究应用包括帕金森氏症、老年痴呆症、糖尿病、非酒精性脂肪肝以及肿瘤边缘检测。

4 回答511 围观

问全分子成像和单分子成像的区别

sswei

全分子成像提供了用一个系统发现、识别和测量分子目标，对各种各样的分子类型进行无标签成像研究，从最小的样本中提取最大的信息，明确和客观地解释分子成像信息。单分子成像可以分为两类：一类是在外力作用下研究单分子活动，通常通过原子力显微镜（AFM）、光镊（OT）或磁镊（MT）将力施加到单个分子上。另一类就是用荧光显微成像观察生物系统中单分子活动。

4 回答537 围观

问质谱成像的主要临床应用有哪些？

sswei

MALDI成像在肿瘤学、神经疾病学、心脏病学和风湿病学等生物医学研究领域的应用范围。MALDI成像应用包含蛋白质表征、糖蛋白分析、质量控制应用、聚合物分析和超高通量筛选等。在临床研究中，大约85%的MALDI成像与癌症研究有关，其它15%的MALDI临床研究应用包括帕金森氏症、老年痴呆症、糖尿病、非酒精性脂肪肝以及肿瘤边缘检测。

4 回答775 围观

问色谱样品提纯需要注意的问题？

sswei

气相色谱仪分析前制备样品时需注意的几个问题：1、首先要考虑将被分析的样品中，可能干扰欲被测组分定量的物质要尽可能的分离出去。还要考虑通过样品制备使被测组分在试验样品中的含量得以提高即样品浓缩，以便最后的气相色谱仪分析。2、再一在制备样品时，要考虑欲分析样品中的被测组分是否流失，是否能100%定量地转入到制备好的，可用于色谱分析的实验用样品中去，这样才可以使分析结果准确无误。 3、另外要考虑实验用样

4 回答530 围观

问ALP标记抗体方法步骤？

土井挞克树

流程：过碘酸钠氧化-乙二醇终止-加入抗体-碳酸盐透析-硼氢化钠还原-硫酸铵沉淀-溶解透析。

2 回答901 围观

问在反转录制备cDNA的第一阶段，加入引物和模板RNA以后，需要65°℃变性处理5分钟，有什么作用？为什么？

juyue2010

主要是为了打开RNA中的二级结构，产物引物于模版结合

3 回答2105 围观

问免疫印迹单组分TMB沉淀型显色液

loveliufudan

单组分TMB显色液是一种常用的酶标记试剂，可以用于检测Western blot和ELISA等实验中的蛋白质。使用单组分TMB显色液在膜上显示的条带较浅，可能是由于显色液的浓度不足、显色时间不够长等原因造成的。为了获得更深的显色效果，您可以尝试以下方法：增加显色液的浓度：可以尝试增加单组分TMB显色液的浓度，但需注意不要过度稀释，以避免背景杂色增加。延长显色时间：可以延长显色时间，但不要过度延长时间

2 回答1295 围观

问请问乙型溶血性链球菌在哥伦比亚血平板中培养超过24小时会发生自噬吗

huarenqiang5

乙型溶血性链球菌在血平板中培养超过24小时一般都会发生自噬。

4 回答390 围观

问细胞油红O染色一定要做成爬片吗

huarenqiang5

不是必须要进行爬片，但是建议进行爬片，因为直接在板里染板的话可能会导致染的不均匀，而影响观察从而导致结果有误。

3 回答1880 围观

问IF用于小鼠的一抗是否能用于大鼠

此用户已注销

抗体-抗原有着严格的耦合性，小鼠的用在大鼠实验中，理论上是可行的，不过实验结果还是有待验证。比如剂量问题，有没有效果，甚至会不会有免疫反应，都要进行严格验证。

4 回答1734 围观

问抗体纯化后的甘氨酸需要去除吗？甘氨酸的影响大吗？

是TTT

抗体纯化后的甘氨酸需要去除，甘氨酸的影响倒是不大，但是一般都会进行洗脱去除

5 回答1289 围观

问幽门螺旋杆菌的培养使用配套培养基还是自己配比较经济实惠？

那兔那兔

配套的成功率高点，自己做的话比较麻烦，万一不成功还得重来

5 回答436 围观

问组织切片可以观察到生物发光吗?

balalaLy

生物发光一般活体可以观察，动物内部脏器或者想要观察局部细胞的情况也可以将局部组织取出或做成切片。这个跟你使用的发光材料有关。

3 回答477 围观

问已知酶怎样查找相关基因？

loveliufudan

如果您已经知道某个酶的名称或序列，可以使用以下几种方法来查找与该酶相关的基因：基因数据库搜索：可以使用各种基因数据库，如NCBI、Ensembl、UCSC Genome Browser等，来搜索与该酶相关的基因信息。在数据库中搜索时，可以输入该酶的名称或序列信息，以查找与之相关联的基因信息。基因家族搜索：如果已知该酶属于某一特定的基因家族，可以使用各种基因家族数据库，如Pfam、InterPro等

3 回答5189 围观

问各位大佬，胶体金半定量检测原理是啥啊

loveliufudan

原理是基于胶体金颗粒与抗体之间的特异性反应，在检测过程中，通过检测胶体金颗粒的颜色变化来判断目标蛋白质的相对含量。具体操作方法如下：制备胶体金颗粒：制备具有一定大小和形状的胶体金颗粒，并表面修饰特定功能基团的化学物质。包被抗体：将特异性抗体与胶体金颗粒表面的功能基团进行反应，包被抗体。准备标准曲线：用已知浓度的标准样品制备一系列浓度不同的标准曲线，作为半定量测定的参照。加样：加入待测样品和标准曲线

2 回答874 围观

问关于多转录本PCR

loveliufudan

如果您已经优化过反应条件，但仍然出现多条带或无法扩增出全长片段，您可能需要考虑以下几点：引物设计：确保引物的特异性和合适的长度、浓度和退火温度。PCR条件优化：尝试优化PCR反应条件，例如，反应体系、退火温度、扩增循环数等，以提高扩增效率和特异性。产物纯化：进行PCR产物纯化，如凝胶回收或其他柱式纯化方法，以去除杂质并提高产物纯度。转化策略：如果您无法扩增全长片段，您可以考虑使用多段扩增、基因组编

2 回答796 围观

问提pbmc做流式胞内染色，刺激5小时后贴壁细胞消化不下来

loveliufudan

可以考虑以下几个方面来解决问题：调整胰酶浓度和消化时间：尝试使用不同浓度的胰酶和不同的消化时间，以找到最佳的消化条件。尝试其他消化酶：胰酶可能不是最适合消化PBMC的酶，您可以尝试其他消化酶，例如，Trypsin-EDTA、Collagenase、DNase等。使用细胞分离液：使用细胞分离液可以更加有效地分离PBMC，并消化贴壁细胞。常用的细胞分离液有Ficoll-Paque、Histopaque

2 回答653 围观

问求助巨噬细胞提取的一些问题

loveliufudan

在进行腹腔巨噬细胞的提取时，选择雌性小鼠的原因是由于雌性小鼠在生理周期上的变化会对腹腔巨噬细胞的数量和活性产生影响，因此在一些实验中选择在同一周期的雌性小鼠进行提取可以减少实验误差。此外，由于雄性激素可能影响巨噬细胞数量和功能，因此雄性小鼠在一些实验中不常用于腹腔巨噬细胞的提取。具体来说，雌性小鼠在生理周期的不同阶段，腹腔巨噬细胞数量和活性会发生变化。例如，雌性小鼠在发情期和妊娠期时，由于激素水平

3 回答235 围观

问组织脱水后有凹陷，部分切片镜下有发散的感觉，大小组织都有这种情况，脱水程序如下会是什么原因如何解决

loveliufudan

可能的原因：组织脱水不充分或时间不够，导致残留液体在脱水后形成凹陷和发散感。解决方法：对于脱水不充分或时间不够的情况，可以增加脱水时间和浓度，并且确保每个步骤的时间足够，同时确保脱水时组织浸润充分，以便组织内的液体充分被脱出。另外，如果组织切片时出现凹陷和发散感，可以尝试在石蜡浸润前进行压片处理，以便使组织均匀压平，并避免在脱水和包埋过程中出现空洞和气泡。同时，在包埋时，也要确保组织均匀包裹在石蜡

3 回答276 围观

问荧光素酶的发光是否需要激发光？

EnoshHuang

有荧光素底物就行，不需要激发光

3 回答1357 围观

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