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        C2C12细胞转染效率低

        相关实验:细胞转染

        user-title

        dxy_qk7ynzlq

        最近做C2C12细胞的慢病毒转染,24孔板种了10^5个细胞,1天后转染病毒,转染24小时后换液。设置了MOI的梯度和对应的polybrene对照组。说明书上说转染72-96小时后能看到荧光。但是现在96小时过去了,一点荧光都没有,为啥呀

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        3 个回答

        user-title

        哼宝Henry

        有帮助
        1. 转染时细胞密度是多少?60%左右最佳
        2. 转染试剂是否有问题?
        3. 接种的细胞数偏少
        4. 看荧光是否时间太长导致?荧光是否淬灭?
        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        首先接种的有点少,提高接种量。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        从以下几点找一下原因:

        1.质粒DNA或混和液中含有血清。

        2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优

        3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好

        4.转染试剂选择不当。

        5.细胞密度不是最优,优化细胞密度。

        6.混和加入细胞中不含血清。在转染过程中使用含有血清的培养基,细胞状态良好有利于转染效率的提高。

        7 .转染体系中含有抑制物。

        8.转染试剂保存不正确,转染试剂保存在4℃。

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