关于RNAi转染效率的问题
丁香实验
我打算做结肠癌HT-29细胞株的基因沉默,只想用脂质体进行瞬时转染,希望得到较高的转染效率,但是没有查到有关于这个细胞做RNAi的例子.不过看到有人在这个细胞株做另外一个基因反以核苷酸脂质体包被后转染,并且查到我那个基因在肺癌里面做过RNAi,是不是可以说HT-29细胞在一定意义上具备了做我的那个基因RNAi的条件?
因为我是新手,并且老板的科研经费不太多,所以我需要很充足的准备才敢做这个课题!
1 个回答
丁香实验
有帮助
不知道你是采用反义核苷酸还是siRNA，是直接导入anti－sense或者siRNA片段还是采用构建干扰质粒的方法，如果是直接导入寡核苷酸片段，只能采用特定的干扰转染试剂，推荐Ambion公司的转染试剂，如果是构建的干扰质粒，则可以采用质粒通用转染试剂，比如罗氏的FuGENE 6，效果不错。上述两种试剂都可用于普通质粒转染，优点是操作程序简单，尤其是Ambion的细胞毒性小。我做过许多细胞株，包括一些肿瘤细胞株，转染效率区别不大。不过价格不菲！
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