我做的蛋白质分子量很小（10KD），请问怎么做WB？

1）可选择孔径0.22um的PVDF膜或者NC膜，转膜时间缩短，另外可采用Tricine-SDS-PAGE体系；

2）也可以选择PSQ 膜，同时缩短转移时间。也可以将两张膜叠在一起，再转移。其他按步骤即可。

还是wb的常规步骤，但是因为你蛋白小，制胶你就需要配15%的，这样效果更好。然后转膜的话时间千万别太长了，40-50分钟湿转即可，因为你这个蛋白太小了10kd

分子量很小的话，电泳不要跑的太久以防把蛋白跑出去，转膜可以试着电流恒流转膜，200mA转40min，其他正常封闭敷一抗二抗就好了。

用15%的分离胶或者用预制的梯度胶