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        如何确保共沉淀的蛋白是由所加入的抗体沉淀得到的并避免污染的发生？

        相关实验：免疫共沉淀(Co-IP)

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        小黑猫喵

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        4 个回答

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        张张321

        有帮助

        使用单克隆抗体有助于避免污染发生

        user-title

        txs900416

        有帮助

        主要是要避免污染的来源：例如避免外援性蛋白的掺入，抗体特异性好，裂解液和清洗液不被污染等

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        dxywode

        有帮助
        要确保抗体的特异性，即在不表达抗原的细胞溶解物中添加抗体后不会引起共沉淀。显然抗体来源要可靠，很多在WB上很好的商业化抗体并不能成功使用到ChIP上。超声处理要充分，处理完呢以后DNA一定要跑胶检测看看，如果片段都很大，结果受到的影响很大，特别是如果ChIP组蛋白。
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        天一湖医者

        有帮助

        单克隆抗体的使用有助于避免污染的发生；

        抗体共价偶联到磁珠或者Agarose上——这样在洗脱的时候，抗体就不会被洗到CoIP产物中去，从而避免污染！

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