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100KD左右的蛋白转膜230mA多长时间合适?用的8%的预制胶
申东熙老伯
转膜转90-120分钟比较合适。
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问
我应该加大上样量还是应该加大抗体稀释浓度呢
土井挞克树
建议加大上样量,加大抗体稀释浓度可能假阳性
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问
Roche 的DNase1 酶单位换算
sswei
units是计量单位的意思,1毫克相当于1000个单位,10万单位就是100毫克。这个是试剂的浓度,10X表示十倍的浓度,以此类推,后面分别表示100倍,2000倍,例如10X的溶液,稀释成为1X的,就按照贮存液:稀释溶剂=1:9的比例混合就可以了
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问
请问肺克血清杀伤实验高毒标准菌株被抑制了可能是什么原因?
土井挞克树
可能是菌株的状态不好,或者掺入了杂质抑制物
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问
胎牛血清,用针头分装时,针头不小心插入了手指中,请问有人知道这样有问题吗?
申东熙老伯
没关系的,针头上只有一点点胎牛血清,及时把创口的血挤出来,贴个创口贴。
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问
RAW264.7细胞慢病毒转染
土井挞克树
使用效率高的质粒,或者增加转染试剂
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问
信号通路蛋白和基因处理时间不一致
loveliufudan
有关信号通路基因处理时间和蛋白质处理时间的差别,可能是因为信号通路调控的机制不同。基因处理的时间是指在体内基因发挥功能的时间,而蛋白质处理时间是指从刺激发生到蛋白质表达反应的时间。因此,信号通路的基因处理时间可能需要数小时,而蛋白质反应的处理时间可能只需要数分钟。在某些情况下,短时间内观察蛋白质反应可能更能反映基因处理对信号通路的影响。但是,这并不代表所有情况都如此,具体情况还需要根据研究的特定目
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问
泛素化实验
loveliufudan
可以考虑以下几种方法来寻找E3下游蛋白:1.利用二抗及免疫沉淀技术:在E3泛素化试前后进行免疫沉淀,比对两次免疫沉淀结果以寻找E3泛素化的下游蛋白。2.利用蛋白质组学方法:通过高通量蛋白鉴定技术,例如质谱或者二维凝胶电泳,以寻找E3下游的蛋白。3.利用免疫印迹:在E3泛素化前后进行免疫印迹,比对两次免疫印迹结果以寻找E3泛素化的下游蛋白。请注意,以上方法的精确性可能会受到多种因素的影响,并且需要多
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问
慢病毒qPCR检测没有敲低
bamboopiggy
多设计几个靶点,可能你设计的靶点不好。
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C2C12在cover slip上诱导分化
loveliufudan
C2C12细胞是一种常用的肌肉细胞模型,能够通过诱导分化诱导成肌肉细胞。在cover slips上诱导分化的结果可能受到很多因素的影响,包括细胞的分布密度、细胞间的相互作用、培养条件等。一般来说,细胞分布密度过大会导致细胞接触不良,影响细胞的生长和分化;不足则会对细胞的代谢和生长造成不利影响。因此,使用cover slips上诱导分化时,需要适当调整细胞的分布密度,以保证细胞的生长和分化。在塑料培
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问
thp-1细胞状态和pma诱导
土井挞克树
我建议降低细胞密度再看,现在细胞密度太大了。
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问
泛素化条带没有出现拖带现象,而是出现了几个明显的单独的条带,请问一下是什么原因呢?
dxy_e30rps3r
请问有解决吗?我也出现相同情况,input组ub发光也是正常的,ip组就是有单独条带
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问
准备测ELISA的细胞上清液-80冻存两个半月了还能测出来吗?
balalaLy
有时候收集临床血标本为了凑够标本数也有冻存几个月的
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问
WB实验相关
bamboopiggy
你跟内参比较以后,再分析呢?一般要进行均一化处理后,再分析
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问
求助实验方法
土井挞克树
可以设计实验来验证,实验组是FFA与膜蛋白的结合,然后通过检测游离FFA得到结合率,然后对照组使用已知结合率的物质进行对比,得到结果。
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问
求教泛素化实验
土井挞克树
为什么要转染HA-Ub过表达质粒?转染质粒是后续做泛素化需要的,必须转染。为什么不用WB检测蛋白A的表达?可以用,但是不容易成功。 2023-01-30
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问
多糖作用癌细胞后做WB
土井挞克树
transwell结果和wb结果不同,首先考虑通路是否相反,做凋亡不出的话原因更多,比如污染,状态不好。
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问
innate immunity和Unconventional Immunity的差别
dxyc42u
这两个概念意思一样,只不过是两种表述方式
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问
用液相测定样品中的人参皂苷含量能用对照品溶液吗,价格差距很大的对照品该怎么选择性价比合适的
李亚彪111
理论上可以用对照品溶液,根据仪器性能、检测物质的性质,以及对照品相关的评价标准选择适合自己的
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问
慢病毒转染后48h上清比72h黄是怎么回事?
汤姆卜丽波
不是说24-48是高峰期么,你收了之后要合并的吧只要不影响后面实验就可以啊
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