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科研学霸天团,48小时有问必答
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Calhm2的拮抗剂是什么?怎么把Calhm2和1分开,只拮抗其中的一种?
土井挞克树
EFhd2可以特异性下调Calhm2
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问
为什么在做酶联免疫吸附检测TNF-α酶标仪上的数据超过检测上限?除了浓度过高还有别的原因吗?
loveliufudan
除了样品中TNF-α浓度过高之外,导致酶联免疫吸附检测数据超过检测上限的可能原因还有以下几个:抗原表达量过高:如果你的样品中含有大量表达TNF-α的细胞或组织,可能会导致检测结果超过检测上限。检测方法不够灵敏:如果你使用的检测方法灵敏度不够高,也可能导致数据超过检测上限。操作错误:在进行酶联免疫吸附检测时,如果出现了操作错误,比如反应时间过长或者使用了过多的检测物,也可能导致数据超过检测上限。如果
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问
请问大家这个蛋白上样量再怎么调整吖?
汤姆卜丽波
我觉得多个一两微升不至于变化这么大,有可能是你蛋白降解了,重新提过保证蛋白浓度再跑
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问
有没有大佬能教一下影像组学怎么入门?
sswei
影像组学的研究对象是影像,它的研究方法则是将影像内包含的所有信息提取出来然后进行综合系统化分析。更确切的说,影像组学是采用自动化算法从影像的感兴趣区(ROI,region ofinterest)内提取出大量的特征信息作为研究对象,并进一步采用多样化的统计分析和数据挖掘方法从大批量信息中提取和剥离出真正起作用的关键信息,最终用于疾病的辅助诊断、分类或分级。工作流程包括以下阶段:(1) Imag
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问
高效液相进样要过夜的话最后怎么设置流动相冲洗柱子啊,怎么封柱子啊?
sswei
需过夜保存,可将流速保持在 0.1 到 0.2 mL/min。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
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问
重组蛋白镍柱纯化后去除咪唑的透析方法?
hTJL
师兄师姐,我想问问具体怎么透析?去除纯化后的可溶性蛋白?怎么将His纯化后的蛋白液经过半透膜扩散到不含咪唑的缓冲液或者?怎么透析啊
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问
怎么查找一个寄生虫的热休克蛋白(编码该蛋白的基因序列),
z流沙z
在ncbi上面,输入目的基因,选择相应种属后即可搜索出来
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问
请问一下师兄师姐wb目的蛋白可以在不同时间段收吗
土井挞克树
可以的,时间是根据实验而定的。
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问
【窒息法诱导大鼠心脏骤停-心肺复苏模型求助】
土井挞克树
你可以减少窒息诱导时间,在小鼠出现室颤发时候进行复苏,不一定需要四分钟
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问
southern blot化学发光检测,背景太强,但斑点无信号
balalaLy
你要探索最佳的使用浓度也得按照完整的protocol来,杂交和封闭都是必要步骤,不能省略。
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问
实验求助‖毛状根诱导
土井挞克树
早期是需要另外添加激素的,不然诱导不容易成功
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问
高效液相色谱待测样品浓度确定
Dr_劉医生
在高效液相色谱中,可以通过内标法来确定待测样品和对照品的浓度是否适合检测。内标是已知浓度的化合物,它与待测样品一起进入色谱柱进行分离。在分离后,可以通过内标的峰面积与待测样品的峰面积之比来计算待测样品的浓度。另外,对照品浓度与峰面积之比等于样品中浓度与峰面积之比,由此可以计算出样品的浓度。
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问
免疫共沉淀 igg组和ip组阳性 input组阴性
行内顶尖人才
楼主这个问题解决了吗,条带位置在哪里,虽然使用了避免轻重链的二抗,如果没有目的蛋白也会将轻重链曝出来。我的input组一直没有条带,楼主咋解决的啊,万分感谢
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问
空白组也出现了flag标记怎么回事
sswei
试样中除待测组分外的其它组分的干扰。
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问
wb条带连着怎么回事?用同样的胶跑其他抗体就好着。大佬们,能不能帮我看看啊?
loveliufudan
可能是以下两个原因造成的:过量载入样品:过多的蛋白质样品可能会导致过多的条带出现在同一个区域。可以尝试减少载入量。抗体特异性问题:抗体可能会交叉反应多个蛋白质,导致出现多个条带。可以尝试使用更具特异性的抗体或者对抗体进行再验证。
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问
质粒转入DE3感受态细胞中菌液PCR总是没有条带?
loveliufudan
可能有以下几种原因:质粒转化效率低:转化的效率低可能导致在菌落PCR检测中出现假阴性结果。您可以尝试重新制备感受态细胞,注意细胞的生长状态和转化的时间等因素,确保转化效率足够高。质粒没有正确复制:感受态细胞内的大肠杆菌染色体和质粒的DNA竞争复制的情况下,质粒可能无法正常复制,导致质粒的拷贝数不足,PCR检测不出条带。您可以尝试使用一些复制更高效的质粒或增加抗生素筛选压力来提高质粒的复制数。PCR
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问
小鼠细胞的敲降慢病毒可以能用到大鼠细胞吗?
z流沙z
应该是不行,除非靶向的序列刚好一致性很高
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问
nih3t3嘌呤筛选浓度
z流沙z
puro浓度还是需要再稍微摸索一下,跟细胞状态有关。MOI也需要摸索一下,取决于病毒包装的效果
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问
慢病毒包装 转染48小时后细胞这是死了吗?293t细胞全变黄了,包装的时候该怎么改进啊
z流沙z
如果转染质粒量比较大,要求转染时的细胞密度比较高,这样子需要的培养基也比较多
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问
WB最近遇到了好多问题,求帮助!
z流沙z
1、配胶要充分混匀,没有杂质,样品要离心取上清,不要混有颗粒状物质或者细胞沉淀。2-3、小分子蛋白可以配高浓度如15%的胶,减少电泳和转膜时间,比如电泳80v 30min和120v 至分开即可,像你蛋白这么小的转膜200mA 1h完全足够
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