实验问答22,073,495 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问分泌性蛋白

dxyc42u

分泌性蛋白是指分泌到细胞膜外的蛋白质。分泌性蛋白通过内分泌、旁分泌、自分泌等途径发挥作用。可以作用于自身细胞

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问90kDa目标蛋白条带弥散，背景高

loveliufudan

下面列举一些常见的可能性： 1. 过量样品加载：如果您在电泳过程中加载了过多的样品，蛋白质条带可能会变得模糊并且背景信号增加。尽量控制好加载的样品量，确保在适当范围内。 2. 没有足够的堆积凝胶：堆积凝胶是电泳中分离蛋白质的重要部分，如果堆积凝胶不够厚或质量不好，可能导致蛋白质条带弥散和背景增加。确保使用质量良好的堆积凝胶，并按照正确的程序进行制备。 3. 电泳条件不当：电泳条件对于蛋白质分离的效

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问琼脂糖凝胶电泳

dxyc42u

可能是因为你的胶浓度偏低，或者质量不是很好导致分辨率不好。酶切后拖带，更加提示是胶的质量不好。建议换用高质量的胶

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问想问各位前辈，如何提取乙酰胆碱转移酶？

晓雨知春来

可以用柱层析提取法提取乙酰胆碱转移酶。

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问英文学术论文中，如何避免歧义句子？

晓雨知春来

(1) 措辞须精简明确学术英文的写作要将信息的清晰性放在第一位，语言清楚和简洁，以免迷惑读者，从而限制了论文的发表和影响力。冗长的语句容易引起歧义，英语论文写作尽量采用短句，以达到简洁的目的。(2) 行文须专业客观在学术论文中，非正式语言写作能轻易地被英语母语人士识别，影响论文的专业性。而非英语母语的作者通常较难判断哪些是不适用于学术论文写作中的非正式用语。建议可多阅读专业期刊论文，学习已发表论

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问什么是摘要，如何写一个好摘要？

loveliufudan

摘要是一篇学术或科技论文中的简短概括，旨在向读者提供关于论文研究内容和主要结果的简明信息。一个好的摘要应该准确、清晰、有条理，并能够吸引读者的注意力。以下是一些编写好摘要的要点： 1. 确定结构：摘要通常由背景介绍、研究目的、方法、结果和结论等几个部分组成。确保每个部分都简洁明了，能够全面概括论文的主要内容。 2. 简洁明了：摘要应尽量简短，通常不超过250-300个词。使用简明扼要的语言表达关键

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问小分子蛋白（15kd）wb跑不出，且在15kd附近一团阴影？

feixue7758527w

我觉得还是有杂质的，你可能要精炼一下蛋白，然后跑胶的时候时间稍微长一点，如果还是不行，就建议配胶的浓度变大一点试试。

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问WB条带长短不一，该怎么调？

huarenqiang5

建议根据实际出来的内参结果调整上样量试试看。

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问WB实验中，内参出现上下两个条带，是什么原因？

sswei

具体原因可能是该蛋白出现了同源二聚体，故都可以被抗体识别出来或者该蛋白有部分降解，但是未降解部分依然可以和抗体结合，另外抗体特异性不高，也会出现非特异性的结合，造成出现两条或者多条带，所以Western blot会出现两条带

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问胃肠道肿瘤基础研究热点？

dxyc42u

肠道肿瘤免疫组化蛋白组学方面比较热门

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问在ELISA定量或半定量检测中，如何选择合适的检测二抗或检测方式？

dxyc42u

一般来说，二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。

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问在ELISA定量检测实验中，如何选择合适的检测二抗？

dxy_uvsexwc5

根据实验要求的特异性进一步筛选二抗Anti-IgG (H+L)是最常用也是性价比最高的二抗形式，这类抗体和IgG分子的重链和轻链都可以反应，也可以和其他的免疫球蛋白家族（IgM，IgA，IgD,IgE）和亚家族反应，因为所有的免疫球蛋白都有相同的轻链。 Anti-IgG，Fc fragment specific这类抗体和IgG重链的Fc部分反应，与F(ab’)2或Fab无交叉反应，但可能与IgM或

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问成骨诱导求助

huarenqiang5

首先要对内、外环境定期进行消毒灭菌处理，其次操作时必须保持无菌操作，这样基本上就可以不被污染。

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问Wb条带问题

sswei

背景比较脏，建议可以封闭时间稍微延长，然后抗体特异性不高，建议换一个特异性高

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问自己包被的ELISA板用什么样品来做标准曲线？

奋斗吧半月

可以拿商用的标准品测你的待测样品，然后获得已知样品后，等比稀释作为你的包被板的标准样品用

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问求助求助

loveliufudan

这种结果可能有多种可能的解释： 1. 实验孔中可能存在其他影响测定结果的因素：实验孔的大数值可能是由于除了菌液和试剂外，还有其他物质或因素影响了NPN膜渗透的测定结果。这可能包括实验孔中存在的其他溶质、悬浮物、表面活性剂或其他化学物质。 2. 实验孔中菌液浓度较高：实验孔中的菌液浓度可能较高，导致NPN膜渗透的结果较大。如果实验孔中的菌液浓度超过了合适的范围，可能会引起异常的结果。 3. 操作误差

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问想问一下用mTORin处理细胞短时和长时的区别？

土井挞克树

mtorin对蛋白表达有抑制作用，处理时间长会导致蛋白表达下降

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问学硕科研已分离血浆的血液样本是否能再提取血小板

土井挞克树

可以再次提取血小板，按照标准操作就可以

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问泛素化实验怎么做呀

土井挞克树

具体步骤：主要有两步：第一步，泛肽激活酶、泛肽载体蛋白、泛肽-蛋白连接酶共同作用下，将泛肽C端的羧基与底物蛋白的赖氨酸残基的ε氨基形成异肽键，后续泛肽以类似的方式连接成串，完成对底物蛋白的多泛肽化标记。第二步，多泛肽化标记的底物蛋白被26S蛋白酶体迅速降解称成为小肽片段，再由其它肽酶水解为游离的氨基酸。

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问友友们dot blot求助

土井挞克树

可能是过度曝光，调整一下曝光强度和曝光时间。

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