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科研学霸天团,48小时有问必答
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含GFP标签菌诱导前变绿
晓雨知春来
有可能是细菌污染了,你可以进行无菌实验和分析以确认是否存在背景杂菌。
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问
一般情况下,WB实验中提取的蛋白是不是总蛋白?是否包括细胞核蛋白、膜蛋白?
feixue7758527w
是的,一般情况下WB提取的蛋白是总蛋白的,当然也有特殊的提取蛋白办法,可以提取特定蛋白的。
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问
eLISA实验,每个指标的酶标板能通用吗?
loveliufudan
对于elisa实验,每个指标的酶标板通常是专门设计和涂层的,以适应特定的检测目标。酶标板是用于捕获和检测特定分子(如蛋白质、抗体等)的固相平台。不同的指标通常需要使用不同的酶标板,这是因为每个指标具有不同的特性和特定的检测需求。酶标板的涂层物质、结构和特性需要与待检测分子相匹配,以实现高灵敏度和特异性。因此,通常情况下,每个指标都需要使用专门设计的酶标板,以确保准确和可靠的检测结果。在实验中,根据
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问
酶标板加错了怎么办?洗了重加,还是再买一块。
飞跃迷雾1
可以清洗后再用。酶标板的清洗可用酶标板洗板机进行,酶标板洗板机用于清洗酶标板检测后的一些残留物质,洗干净后还可以使用。
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问
想跑一下EMT的相关蛋白求指教
loveliufudan
在验证细胞迁移和侵袭能力的变化时,可以考虑以下一些与EMT(上皮间质转化)相关的蛋白和相应的抗体: 1. E-钙黏蛋白(E-cadherin):EMT过程中,E-cadherin的表达下调,其丧失与细胞迁移和侵袭能力的增强相关。 2. N-钙黏蛋白(N-cadherin):EMT过程中,N-cadherin的表达上调,其增加与细胞迁移和侵袭能力的增强相关。 3. Vimentin:Vimentin
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问
ELISA里配几个酶标板?如加错了或者要做预实验酶标板会不会不够?单独有售卖酶标板的吗?因为酶标板包被抗体(夹心)能否通
麻黄连翘赤小豆
最好不要加错,酶标板不够再买一块Elisa的板子重新加样,因为Elisa本来稳定性也比较差
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问
求助生化大佬,GST标签目的蛋白纯化时结合不上beads怎么办呢?该如何调整实验条件?
晓雨知春来
可以尝试调整结合缓冲液中的盐浓度。增加盐浓度(如NaCl) 可以有助于促进GST标签与GST beads的结合。
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问
wb图片处理用什么软件?
loveliufudan
以下是一些常用的软件选择: 1. ImageJ/FIJI:这是一个免费开源的图像处理和分析软件,广泛用于科学研究领域。它具有许多功能,包括图像增强、对比度调整、标注和量化分析等,非常适合WB图像的处理和整理。 2. GIMP:这是另一个免费的图像编辑软件,类似于Photoshop,具有许多高级图像处理功能。GIMP提供了图层、选择工具、滤镜等功能,可以用于对WB图像进行编辑和调整。 3. Adob
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问
求助各位大佬
飞跃迷雾1
会不会跟温度有关系呢,建议是现用现配,DMSO在4度有析出是正常的,可以用DMSO配成母液,-20度保存,需要用了常温解冻,再加培养基稀释,现配现用。
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问
跑电泳出现这种情况是啥原因呀 就是
麻黄连翘赤小豆
抗体特异性较差,洗膜时间太短了,建议延长
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问
求老师解答
晓雨知春来
有可能是低甲基化可能导致某些细胞信号通路的过度激活,从而促进癌症的发展和恶化。这些信号通路可能与细胞增殖、侵袭和转移相关导致预后不良。
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问
求助WB一抗属性
麻黄连翘赤小豆
对,可以用小鼠抗小鼠,说明书能用就可以,就有时候会有非特异性条带出现
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问
氧化成一个还原型?是否矛盾?
loveliufudan
在谷胱甘肽过氧化物酶系统中,两个分子的谷胱甘肽(GSH)通过形成连接半胱氨酸残基的二硫键被氧化成一分子还原型谷胱甘肽(GSSG)。这是因为氧化作用引起了GSH中两个半胱氨酸残基的氧化反应,从而形成了GSSG。换句话说,GSH分子中的两个半胱氨酸残基之间的二硫键被打破,生成了两个GSH分子中的一个GSSG分子。谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase)则催化了将GSSG还原回GSH
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问
这张GEPIA的图F值是什么意思呀?有意义吗?
sswei
从图中结果显示F值为2.48,将这一数值与显著性水平的F进行比较,大于显著性的F值,那么P则小于该显著性的概率,F>F(0.05),那么P<0.05,说明处理间差异显著。
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问
脂多糖诱导人气道上皮细胞模型?
huarenqiang5
建议用25μg·mL^(-1) LPS诱导细胞24h。
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问
原核表达一种细菌的外膜蛋白
huarenqiang5
这种情况下建议更换载体比较好。
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问
ELISA检测法进行筛选时,阴性对照孔
sswei
Elisa法筛选时,阴性对照孔显色值较高,常常是因体系里未融合浆细胞分泌抗体干扰检测结果。
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问
在蛋白纯化中NaCl浓度如何选择
loveliufudan
1. 细胞培养基中的NaCl浓度通常在120-150毫摩尔之间。这个范围被认为是维持细胞正常生长和功能所需的适宜浓度。具体的培养基配方和制造商可能会有细微的差异,因此建议参考您使用的具体培养基的说明书或文献。 2. 当额外添加的补料导致细胞培养基中的NaCl浓度超过原有范围时,可能会对细胞的生长和功能产生影响。高浓度的NaCl可能会引起渗透压的变化,对细胞的渗透平衡和水分调节产生影响。这可能导致
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问
论文引言怎么才能吸引读者的目光
土井挞克树
好的引言应按一定的逻辑结构书写,以便读者在阅读引言后,能了解论文关心的问题是什么、清楚问题的来龙去脉与重要性,并知晓论文余下部分的安排。除此之外,引言还需要为读者准备一些包括关键术语定义在内的基本知识,以便读者能顺利进入全文的阅读。标准的引言主要由背景问题、需求问题、剩余问题和本文研究问题四部分构成,这四部分之间以及本文研究问题与论文余下部分之间还需要一些衔接内容,以此方式书写的引言最方便读者了解
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问
ChIP IP时需要定量吗?
huarenqiang5
是的,ChIP IP时需要进行定量。
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