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用Epiquik试剂盒提取组蛋白,分装好之后-80保存,第二天跑胶,有时候能跑出条带有时候没有,在同一块胶上有时候也是这个情况

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_023c0vrr

需要将5个样品的H3条带一致,可有的泳道条带比较细或者没有,到底是为什么啊,分装的时候也是混匀的

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4 个回答

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土井挞克树

有帮助

比较细可能是上样量不同的原因,调整上样量会改善

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loveliufudan

有帮助

出现条带不一致的情况可能有几个原因:

1. 技术操作:确保在提取组蛋白和分装样品时,操作技术要准确和一致。混匀样品时要均匀搅拌,确保每个样品中的组蛋白含量均匀分布。

2. 组蛋白含量和质量:不同样品中的组蛋白含量和质量可能有差异,这可能导致不同的染色强度和条带表现。确保在提取组蛋白时使用相似的样品量,并尽量控制组蛋白提取过程中的变异性。

3. 染色剂和胶条件:确保在跑胶时使用相同的染色剂和胶条件,包括染色剂浓度、电泳缓冲液和电泳条件。这有助于提高染色的一致性和可重复性。

4. 染色时间和显影:染色时间过长或过短,或者显影的时间不一致,可能导致条带强度不同。确保在染色和显影过程中严格按照说明书的建议进行操作,并控制反应时间一致。

如果你希望获得一致的H3条带,可以尝试以下优化措施:

• 使用相同浓度的组蛋白样品,并确保提取的组蛋白质量和含量一致。

• 混匀样品时,确保充分混合,以确保样品的均匀性。

• 使用相同的染色剂和胶条件,并严格控制染色和显影时间。

• 尝试增加显影的敏感性,例如使用敏感度更高的显影剂。


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huarenqiang5

有帮助

考虑可能是每次上样量不均等所导致,建议蛋白样品上样量最好相等,不要过多。

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dxyc42u

有帮助

很可能是胶制的不均匀,导致某些孔道跑不出来

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