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您好,想请问为什么有时候曝光出的蛋白条带会出现缺孔呢?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_ilcpetn8

实验操作都是一样的,有时候就会缺孔

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3 个回答

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土井挞克树

有帮助

可能是曝光的时间过短或者曝光强度过大,建议调整

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loveliufudan

有帮助

存在以下几个可能的原因:

1. 操作错误:在电泳过程中,如果样品未完全加载到凝胶孔洞中,或者样品在加载时滴落到周围的区域,可能导致某些孔位缺失。确保在加载样品时小心且准确地将样品加载到凝胶孔洞中。

2. 凝胶准备问题:如果凝胶的制备过程中存在问题,如凝胶孔洞形成不均匀或凝胶中存在气泡,可能导致某些孔位出现缺失。确保凝胶制备过程中的均匀性和完整性。

3. 电泳条件不当:不正确的电泳条件(如电场强度、电泳时间)可能导致某些孔位的蛋白条带无法迁移到所期望的位置。确保使用适当的电泳条件,根据蛋白的大小和目标分离效果进行优化。

4. 稀释问题:如果样品在加载前被过度稀释,某些孔位可能无法检测到足够的蛋白量,从而导致相应的条带缺失。确保在加载样品时使用适当的稀释比例,以保证在凝胶上获得可见的蛋白条带。

5. 蛋白质本身的问题:某些蛋白质可能在电泳过程中由于其特性而导致迁移异常或无法被检测到。这可能与蛋白质的大小、电荷或结构等因素有关。


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huarenqiang5

有帮助

考虑可能是过高的蛋白上样量或一抗和二抗浓度过高导致。

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