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科研学霸天团，48小时有问必答

问蛋白质谱鉴定不成功一般有哪些因素?

huarenqiang5

质谱鉴定不成功主要有两类，一类是质谱效果不好，一类是没有可参考的蛋白数据库。

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问哪些样品需要去除高丰度蛋白？怎么去除？是否需要费用？

小Q医僧

①一般情况下，血清、血浆样品中都会存在高丰度蛋白（白蛋白等免疫蛋白），一定需要去除高丰度蛋白；目前有成熟的试剂盒可以去除血清中的高丰度蛋白。②体液样品，细胞培养液等样品，出现高丰度蛋白的情况也比较高，这类样品，如果出现高丰度蛋白，需要先通过质谱鉴定是否是常见免疫蛋白，然后再采用高丰度蛋白去除试剂盒进行去除。③其他样品存在高丰度的情况不常见，如在实验过程中发现高丰度蛋白，解决方案如上。其他样品可能会

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问WB中Tween-20dl的作用是什么呢？仅仅是复苏抗原吗？如果是复苏抗原，他又是怎么实现抗原复苏的呢

balalaLy

tween20就好像是洗洁精，可以洗掉膜上的杂质

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问蛋白质组学中质谱结果蛋白筛选问题？

此用户已注销

蛋白质筛选的方法有很多种,其中最常用的是亲和层析法。这种方法利用蛋白质与其特定配体之间的亲和力,将目标蛋白质从混合物中分离出来。例如,如果我们想筛选出一种与某种药物结合的蛋白质,我们可以将药物固定在亲和树脂上,然后将混合物通过亲和树脂柱,药物与其结合的蛋白质就会被捕获下来。除了亲和层析法,还有许多其他的蛋白质筛选方法,如蛋白质芯片技术、蛋白质工程等。这些方法都有其独特的优点和适用范围,可以根据具体

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问核质分离定位和 confocol 定位哪个可信度更高？

huarenqiang5

在其他条件相同的情况下核质分离定位的可信度要高些。

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问蛋白质样本保存问题求助？

feixue7758527w

原则上低温保存或者液氮保存是可以长久保存的，不会对实验有什么影响的。如果只是常温保存，估计也就是一两个小时的。尽快最好的。

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问蛋白质组学中蛋白质谱鉴定的问题求助？？

qzming65

如果没有合适数据库导致鉴定效果差，可以通过更换范围更大的数据库、近源物种数据库，或采用相关研究物种的蛋白、EST数据库等构建本地数据库的方式解决

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问请问，WB中一抗是如何取代封闭液的，一抗与二抗的结合又是通过怎么样进行的，是通过抗原决定簇与互补决定区吗？

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利用一抗和二抗来检测目标蛋白质。一抗是指特异性结合目标蛋白质的抗体,二抗是指特异性结合一抗的抗体。通过这种方式,可以检测出目标蛋白质的存在和表达水平。

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问WB为什么不能选用琼脂糖凝胶跑电泳，而是选择SDS-PAGE跑电泳？

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SDS－PAGE是竖胶，电泳点样孔与电泳方向平行，点样的时候肯定会造成样品分布不均。所以需要一个高浓度的胶来预电泳保证在分离胶的时候所有蛋白处于同一水平。而琼脂糖凝胶电泳时，胶是横着的，点样孔方向与胶的方向垂直，所以加样的时候不会导致样品电泳时不在同一水平。

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问用乙醇回流提取和超声提取过滤后都要进行冻干才能上液相嘛

sswei

用乙醇回流提取和超声提取过滤后都要进行冻干才能上液相

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问蛋白组学的国内外研究进展

loveliufudan

蛋白组学的研究进展可概括如下:1. 蛋白质组分离技术取得长足进展,如双向电泳、液相色谱、质谱技术等,可以进行高通量和高灵敏度的蛋白质分析。2. 蛋白质组数据库的建立,如Swiss-Prot数据库,收集了大量蛋白质序列和结构信息。3. 蛋白质组Modification的研究,揭示了翻译后修饰的重要性。4. 蛋白质相互作用研究取得进展,如酵母双杂交系统可以高通量检测蛋白间的结合。5. 蛋白质组学与基因

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问蛋白组学入门相关问题请教

loveliufudan

蛋白组学入门可以关注以下几方面:1. 了解蛋白组学的基本概念和研究内容首先需要理解什么是蛋白组学,它的研究内容包括蛋白质的表达、结构、功能、互作用网络等。2. 了解常用的蛋白质分离技术如双向电泳、高效液相色谱、质谱技术,这些都是分离和鉴定蛋白质的重要技术。3. 了解蛋白质组学数据库如Swiss-Prot、Trembl等数据库,这些数据库收集了大量已知蛋白质的序列和功能信息。4. 了解蛋白质组学研究

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问防御素目的基因怎么找?

dxy_mqg1dtg8

1.NCBI中的mRNA通常是指已经被转录成mRNA的基因序列。而cDNA是通过反转录过程将mRNA转化为DNA而得到的。所以，可以说NCBI中的mRNA是cDNA的其中一条链，但并不是完全等同于cDNA。2.文献中的基因序列比NCBI的基因序列短可能有多种原因。一种可能是文献中提及的基因可能只包含核心部分的序列，而NCBI中的序列可能包含了更多的非编码区域。另一种可能是NCBI中的序列可能经过了

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问二维电泳和液相色谱联用质谱在蛋白质组学研究中的优势是什么?

晓雨知春来

当前分析大量蛋白质和生命周期较长的蛋白质的最佳方法。

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问请问蛋白质组学研究中的蛋白质定量方法有哪些?各自的应用范围和优缺点是什么?

晓雨知春来

紫外分光光度法、凯氏定氨法、双缩脉法Folin-酚试剂法(Lowry法)、BCA法、胶体金法。考马斯亮蓝染色法、银染法、荧光法

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问检测细胞活性氧（羟基自由基），用APF探针，拍不出来，步骤如下

晓雨知春来

阳性药物作用时间可能需要延长，8小时可能不够。

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问做响应面优化实验提取红景天苷，绿原酸，迷迭香酸时，是用乙醇超声提取好，还是用乙醇回流提取好？

晓雨知春来

建议使用乙醇超声提取可能好一点。

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问蛋白组学领域的期刊推荐

loveliufudan

蛋白组学方向审稿周期较短的期刊建议如下:1. Journal of ProteomicsJCR影响因子约5.5,审稿周期平均约1-2个月。国际著名的蛋白质组学专业期刊,发表质量高。2. ProteomicsJCR影响因子约3.5,审稿周期在1-2个月左右。也是蛋白质组学领域代表性期刊之一。3. Molecular & Cellular Proteomics JCR影响因子7.6,审稿周期

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问做高效液相色谱实验时，建立对照品浓度与峰面积的标准曲线图是干什么用的？

此用户已注销

利用外标法做一个浓度与峰面积（或峰高）的标准曲线，用待测样品的峰面积在曲线上代入，得到样品的浓度，是对待测物的定量分析。

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问请问谁有KLF5的抗体吗，几微升就可以，申请不到试用装，但是需要验证，实验室不能先买大包装抗体，可以交换看你需要？

晓雨知春来

我们这里有，可以提供一些给你。

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