丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
蛋白质
实验问答
23,579,222 科研人在看
科研学霸天团,48小时有问必答
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
急!!!求助:ELISA试剂盒测定细胞培养上清中的酪蛋白浓度,为什么含血清比无血清浓度更低?
此用户已注销
包被抗原的浓度较小,阳性血清中抗体量大于包被抗原的量而出现钩状效应(后带效应),见意将阳性血清做一下浓度曲线看一下,或者采用棋盘滴定或单项滴定重新确定包被抗原浓度
3 回答
329 围观
3 回答
329 围观
去回答
问
跑了大半个月,IRF3只跑出过一次,这是抗体有问题吗?内参还算可以?
Eason老歌迷
没看出来有条带,你转完膜封闭可以用丽春红染色看一下有没有条带,或者你延长一下封闭时间,背景太脏。
3 回答
342 围观
3 回答
342 围观
去回答
问
请问用酶联免疫试剂盒检测细胞培养上清的酪蛋白浓度,如果样本OD值低于标准曲线最低浓度的OD值会怎么样?说明检测结果不准确吗?
Eason老歌迷
你只做了一次实验吗?可以多做几次重复实验。一般标曲OK,试剂盒基本没有质量问题,这个时候先去分析样品和保存方法的原因。建议用新鲜样品检测,将标准品稀释后加入血清或血浆中检测(也就是血清进一步稀释标准品),观察检测结果,判断是否是血清中有未知物质影响。
4 回答
194 围观
4 回答
194 围观
去回答
问
小白想问问各位老师WB实验中内参是在每个泳道中都加吗,还是其他
简简单单的8872
不需要单独加,同一个样品中同时检测内参蛋白和目标蛋白
6 回答
320 围观
6 回答
320 围观
去回答
问
我的目的带很弱,如何加强?
此用户已注销
这种情况下可以加定量或者一抗浓度。
6 回答
316 围观
6 回答
316 围观
去回答
问
背景有黑色斑点或有不均匀的白色斑点以及暗背景上白色带,是什么原因导致的?
bamboopiggy
1.背景黑斑一般是抗体不特异。2,不均匀的白色斑点可能是封抗体的时候,气泡没有赶好,3,暗背景白色条带,可能是蛋白量太高,烧心了。
5 回答
286 围观
5 回答
286 围观
去回答
问
无蛋白质的区域具有高背景
此用户已注销
如果是所有的条带都这样,就是封闭的不好,如果是有的没有,就是抗体的饿特异性不好。
6 回答
276 围观
6 回答
276 围观
去回答
问
有什么办法可以提高蛋白提取浓度?
默然前进前行
用水提取蛋白质时,还应考虑盐的浓度、PH、温度等因素。 如:PH 溶液PH影响蛋白质的溶解度和稳定性,蛋白质提取溶液的PH应首先在保证蛋白质的稳定范围,选择偏离等电点两侧的某一点,以增大蛋白质的溶解度,提高提取率等。
5 回答
366 围观
5 回答
366 围观
去回答
问
求分析wb条带问题
dxy_3jhqelx7
可能是杂带,可以尝试封闭时间久一点,洗条带时间长一点
8 回答
331 围观
8 回答
331 围观
去回答
问
求蛋白纯化和测序方面的书籍名字作者
大草原的小灰驴
Terry SpeedMichael S. WatermanKeith R. Mitchelson R R 伯吉斯马文丽 宋艳斌
3 回答
334 围观
3 回答
334 围观
去回答
问
求助 MALDI-TOF检测BSA衍生物总是测不到信号
Eason老歌迷
我做过这个反应,不同物质的化学位移不同。我的化合物中NHS中两组氢的化学位移是4.02氘代氯仿做溶剂。我做的这个反应都是搅拌过夜的,反应要求无水,我用的是重蒸试剂,你换个重蒸试剂看看,再安全点可以无水无氧。确定试剂和溶剂都没问题就没问题了。
2 回答
597 围观
2 回答
597 围观
去回答
问
求助皮肤组织提蛋白方法
一叶障目321
推荐低温匀浆器,皮肤匀浆大概是每次60s,四次,60hz,充分匀浆后会更好裂解
4 回答
1153 围观
4 回答
1153 围观
去回答
问
[求助]用ELISA测血浆中TfR1(转铁蛋白受体1)
冷泉港蛋白
1.如果是临床试剂盒,试剂盒说明书会显示。厂家在开发试剂盒的时候,抗凝、促凝及不同类型抗凝剂,厂家必须做相关实验,只需提前阅读说明书就行了。2.如果是科研类试剂盒,有些厂家也会做相关类似验证实验,可能不会做那么多类型。3.如果试剂盒说明书没有显示。你在UNiProt数据库查下蛋白的结构信息,看下目标蛋白是否含有金属离子,如果有的话,最好不要使用含有抗凝剂的管子,螯合金属离子后,会影响蛋白结构。
3 回答
457 围观
3 回答
457 围观
去回答
问
求助 | Ficoll密度梯度离心法分离PBMC 在离心管底出现细胞膜 吹不开
大草原的小灰驴
把血液加入淋巴细胞分离液一步非常关键,必须要保持液面的平衡,要将离心管口45度倾斜,然后以非常慢的速度,一滴一滴的靠着离心管内壁加进去,慢慢的加入几滴形成一个界面,全过程需要很稳定的手法。1、初始PBMC估计1毫升可以分出来100万个细胞。常规5 ml外周血可以分到undefined10^6-undefined10^7 cell,按照自己所需确定外周血体积。2、分离液与稀释后的血液比为1:2。外周血获得后进行密度梯度离心,最
2 回答
1019 围观
2 回答
1019 围观
去回答
问
求助!请问WB我的条带为什么PLC5显不出Vimentin,Huh7显不出E钙呢?
bamboopiggy
1.首先确定你的细胞确实是plc/prf/5 和Huh7。2.去找你的师兄师姐要他们的细胞试试。3.Vimentin 和E-cadherin在不同的细胞,可能位置稍微你差异,你把膜切的大一些试试
2 回答
475 围观
2 回答
475 围观
去回答
问
WB的上样质量一般是多少
Gx41
30-60ug,根据目标蛋白量调节
13 回答
13956 围观
13 回答
13956 围观
去回答
问
wb总是两边泳道条带颜色浅。
Eason老歌迷
可能是转膜的时候夹子没夹紧,导致两边转膜不完全。
3 回答
263 围观
3 回答
263 围观
去回答
问
求助大佬,跑肝组织stat6总蛋白和磷酸化蛋白趋势相反,这能解释的通吗?
bamboopiggy
有的时候,总蛋白会和磷酸化的蛋白变化趋势是一致的,看你的结果,可以总结为模型使stat6的磷酸化下降,而加药后,会抑制总的stat6的蛋白,但是会使磷酸化增高。来rescue
4 回答
694 围观
4 回答
694 围观
去回答
问
真核蛋白分泌表达
冷泉港蛋白
没有这样的载体。蛋白是否能分泌出来取决于1.蛋白本身的高级结构 2.是否含有信号肽
3 回答
710 围观
3 回答
710 围观
去回答
问
求助|大家是怎么提组织样的总蛋白的?
bamboopiggy
1.你取了中肠以后,先用pbs洗一下,然后直接放入lysis(+cocktail)中,研磨,研磨过程中全程冰上放置。研磨完以后,冰上放置5-10min,然后再离心,然后再加上样buffer煮。2,如果还是做不出来,可以考虑用液氮快速快速冰冻,然后用研钵研磨,然后加入lysis,冰上放置5-10min,然后再离心,然后再加上样buffer煮。
4 回答
523 围观
4 回答
523 围观
去回答
1
•••
105
106
107
108
109
•••
172
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序