背景有黑色斑点或有不均匀的白色斑点以及暗背景上白色带，是什么原因导致的？

1.背景黑斑一般是抗体不特异。

2，不均匀的白色斑点可能是封抗体的时候，气泡没有赶好，

3，暗背景白色条带，可能是蛋白量太高，烧心了。

可能有几个问题，抗体与封闭试剂反应，建议使用前过滤封闭试剂。HRP含量过高，建议降低酶联二抗的浓度。HRP偶联二抗中有聚集体，建议过滤二抗试剂，去除聚集体。你孵育抗体分布不均匀，建议孵育抗体时使用摇床。

条带突然出现白色是转膜有气泡，背景有黑点是奶粉没完全溶解。

有可能是奶粉没完全溶解导致的。

黑色斑点可能是杂质，封闭液溶解不彻底或者后续的buffer不干净。白色斑点可能是转膜时有气泡