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        判断mRNA完整性问题

        相关实验:RNA 反转录

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        juyue2010

        如何判断反转录出来的mRNA是完整的?有哪些方法呢?🙏

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        3 个回答

        user-title

        bernipan

        有帮助

        评估总RNA完整性的常用的方法是使用少量的RNA样品进行变性凝胶电泳并用溴化乙锭(EtBr)进行染色。虽然使用非变性凝胶电泳也是可以的,但其结果可能较难解读。RNA的二级结构会改变其在非变性凝胶中的迁移模式,从而使RNA不会按真实片段大小进行迁移。非变性环境同样会使条带不那么清晰,甚至会产生多条带分别对应于同一种RNA的不同结构。

        完整的总RNA在进行变性凝胶电泳时会产生清晰的28S和18S rRNA条带(真核样品)。28S rRNA条带的强度应当大致为18S rRNA条带的两倍。这种2:1的比率(28S:18S)是判断RNA完整性的一个很好的指标。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        通过琼脂糖凝胶电泳验证RNA完整度。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        可以通过以下指标进行判断:

        ① RNA完整度。

        ② RNA的纯度。

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