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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
组织 RNA 抽提时总是降解,出现一条很糊拖尾的带;但是同时抽提细胞内的 RNA 结果就很好。这是为什么?
Chjiknn
实验前有没有紫外照射超净台,是否有带口罩和帽子,是否彻底隔绝了各种可能产生RNA的途径?
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问
siRNA转染后目的蛋白没有减低是为什么?
alaling
siRNA的直接作用(如果有作用的话)是抑制目标mRNA的表达,所以你应该检测DMT1的mRNA的表达情况,如果mRNA也没有低表达,说明该siRNA设计的不行。你检测蛋白的表达不太科学,毕竟蛋白和mRNA之间还有一道“翻译”的墙隔着,两者的上下调并不一定完全一致。
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问
有用胎盘组织做RT-PCR的吗?
yhy_yun
你可以试试其他内参,例如U6等,胎盘组织和人体其他组织的成分是不一样的。
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问
能够染大鼠MCAO的脑切片么?能够观察的细胞是哪类的?
200210lee
有多糖的细胞或组织
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问
请问目的 cDNA 克隆的鉴定方法有哪些?
吃不饱的猪
还有探针和免疫学荧光转染,酵母双杂交也可以。
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问
如何用 TRIzol 法提取动物血清总 RNA?
L圈圈圆圆圈圈
我用过一款BIOG系列的一步法荧光定量PCR试剂,实验效果不错,价格相对来说也不贵,这个系列有很多产品,染料法和探针法都有。可以试试啊。
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问
人体皮肤组织用 Qiangen 的试剂盒提不出 RNA 是什么原因呢?
tiramisulydia
提取RNA要在通风的橱窗里进行,避免RNA酶的污染,尽量快速,应为过程中RNA会讲解。多次试验如果还是这样那就说明你的RNA的浓度确实比较低。
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问
怎样用试剂提取人尿中的 microRNA,或者有没有好的试剂盒可以推荐?
萧莣苼
在Google scholar中找了了相关的盒子 看到有 Norgen的urine microRNA purification kit ,你可以也找找看吧
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问
RNA抽提后出现奇怪情况
114558606zlm
可能是提取的RNA含有杂质或不纯!
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问
胚胎 RNA干扰是用 shRNA 还是慢病毒?大概什么时期注射?
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问
Trizol提取淋巴细胞总RNA我在提RNA时,可以从-80℃里面拿出来再多加点Trizol 把不溶的沉淀再溶吗?
年华可可
收集好细胞以后,1mL PBS洗一次,然后去掉PBS的时候用移液枪吸出上清900uL以上,之后再把细胞沉淀吹起(留少量液体比较容易吹散细胞,而不是大量液体去吹打),然后再加Trizol,vortex剧烈震荡一分钟,500万个细胞不算多,应该没有问题的
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问
血液样本冻存应该用什么试剂?要先去掉红细胞么?
芳草流年
应该能提出来,我们实验室经常做microRNA提取,试剂盒用过QIAGEN、ROCHE、BIOG,效果都还可以。
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问
RNA提取中 260/280的值怎么样算好?研磨到什么程度是可以进行下去?
极客医生
1.可能还是操作步骤方面的原因。加完氯仿后震摇充分点,离心后取少一点上清,不要贪多,还有乙醇洗涤的时候可以适当轻柔吹吸几遍2.测量是指荧光定量PCR的时候双峰?3.研磨到无明显固体颗粒就行
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问
家兔颈总动脉如何提取 RNA
liona_lin
您可以尝试用研钵加液氮研磨法提取
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问
最后溶解样品用 DEPC 水量多少合适?
dxy_za0jbge8
动物组织或者血清最后加15+20μl
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