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荧光定量PCR不起峰

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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dxy_rbbzeu0r

家人们荧光定量PCR目的基因区域没有峰是为什么啊?

内参的峰值是正常的

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3 个回答

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周末也要努力呀

有帮助

低模板浓度:如果反应混合物中的DNA模板浓度过低,可能无法产生足够的产物来产生荧光信号。这可能是由于样品中的DNA含量过少或提取和纯化过程中的问题。

非特异性扩增:由于引物的选择不当或非特异性扩增的存在,可能导致在qPCR过程中产生多个扩增产物。这些产物可能不会产生明显的荧光信号,从而导致缺少清晰的PCR峰。

引物设计问题:如果引物的设计存在问题,如引物序列与目标序列的互补度不足、引物长度不合适或引物之间的二聚体形成等,可能会影响PCR扩增的效果,从而导致缺少明显的PCR峰。

酶反应问题:如果PCR反应缺少有效的酶反应,如DNA聚合酶或核酸酶H等,会影响PCR扩增的效果,从而导致缺少明显的PCR峰。

实验操作问题:实验操作中的技术问题,如反应体系准备不当、试剂质量不佳、扩增过程中的温度控制不准确等,可能会对PCR反应产生影响,导致缺少PCR峰。

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huarenqiang5

有帮助

可能原因:1、体系没混合均匀。2、引物不好,特异性较差。3、如果都没出来的话考虑是引物的问题。

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高山云初

有帮助

在确定你没加错东西的前提下,可能原因:1、体系没混合均匀2、引物不好,特异性较差不知道你是都没有跑出来还是只有个别孔没有出来,如果都没出来的话你再考虑引物的问题,毕竟不太可能全都没有混合均匀。

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dxy_rbbzeu0ruser-title

可是我的引物验证的时候是单一条带啊,而且条带还挺亮的,呜呜呜  哭死

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