PCR跑胶目的片段大小不对

一般就是非特异性的条带，设计完引物后应在ncbi上面blast一下，确保引物的特异性

可能是存在多聚问题，所以会出现大质量条带。

这种情况可能有以下几种可能性：

引物设计出现了问题。可能引物序列有误，与目的序列不匹配，导致扩增出了不完整的目的片段以及其他未知的片段。建议重新设计引物并优化PCR条件。

模板DNA质量不好。可能模板DNA存在降解、污染或稀释不均等问题，导致PCR反应出现非特异性扩增。建议检查模板DNA的质量，如使用质量更好的DNA提取方法、增加模板DNA的浓度或减少模板DNA的用量。

PCR反应条件不合适。PCR反应条件中包括温度、时间、引物浓度等多个参数，其中任何一个参数的改变都可能导致扩增出现问题。可能需要对PCR反应条件进行优化，如调整温度、时间、引物浓度等参数。

扩增产物受到外部污染。扩增反应过程中可能会受到外部环境污染，如氧气、细菌、其他DNA片段等，导致扩增出现问题。建议在PCR反应前进行充分的消毒，使用高质量的试剂和设备，并在实验室中保持清洁和卫生。