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        qpcr 内参ct值在15-25左右,但是目的ct值在31左右。怎么解决ct值过高问题,数据是否能用?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        藤椒味的大炸鸡

        qpcr 内参ct值在15-25左右,但是目的ct值在31左右。怎么解决ct值过高问题,数据是否能用?

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        3 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        内参在15-25,目的在31是可以的,但是数据能不能用要看melt curve

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可能原因:

        1,内参引物效果不佳:可能原因是引物设计存在问题,比如存在引物二聚体等;另外,也有可能是引物使用时间过久或者保存不当,出现了降解。

        2,RNA质量不好,比如260/280, 260/230值偏低;

        3,反转时RNA含量过低;我们反转20uL体系一般用1ug RNA;

        4,定量时cDNA以及引物含量偏低;

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        表达量低CT值就低了,主要还是要看溶解曲线

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