- ￥1197.90
- 阿拉丁
- 上海
- M665822
- 2026年04月21日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C储存;避免反复冻融
- 英文名：
Multiplex PCR MasterMix
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
M665822-5×1ml
产品内容
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产品简介
2×Multiplex PCR MasterMix (UNG）是由GoldStar Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs（含dUTP）、UNG酶以及PCR稳定剂等组成的PCR预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程，只需进行简单的条件摸索即可轻松进行多重 PCR反应。
本产品所含的GoldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶，可以有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。独特的缓冲体系，使多重PCR反应所有的引物都能有效延伸，无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer，有助于实现“困难”模板（比如，高GC含量的模板）的高效扩增。本产品运用dUTP-UNG 防污染系统，可有效去除了PCR产物的残留污染，大大降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活，因此不会影响新的含dU 碱基PCR产物的形成
Multiplex PCR MasterMix (UNG）可有效防止PCR产物的残留污染，适用于防污染多重PCR反应，比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
质量控制
经检验无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；2-8℃存放3天，扩增性能无明显改变。
使用方法
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1. PCR反应体系：
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注意：引物设计时，尽量减小各引物的Tm间的差值，差值尽量控制在5℃以内。各引物浓度请以 终浓度0.05-0.2μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特 异性扩增时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2．PCR反应条件：
注意：1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时， 适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的GoldStar Taq DNA Polymerase 的扩增效率为1 kb/min。
3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环 次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数
3．结果检测：本产品不含染料，反应结束后，取5 µl反应产物加入适量上样缓冲液后 进行电泳检测结果。
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文献和实验Troubleshooting for PCR and multiplex PCR
some/all of the above 3. Reaction was working before, but now I can't get any product. Make sure all PCR ingredients are taken in the reaction (buffer, template, Taq, etc) Change the dNTP solution (very sensitive to cycles of thawing and freezing, especially in multiplex PCR)
Multiplex PCR is a variant of PCR which enabling simultaneous amplification of many targets of interest in one reaction by using more than one pair of primers. Since its first description in 1988 by Chamberlain et al, this method has been applied
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多重PCR的主要用于多种病原微生物的同时检测或鉴定和病原微生物，某些遗传病及癌基因的分型鉴定。多种病原微生物的同时检测或鉴定，是在同一PCR反应管中同时加上多种病原微生物的特异性引物，进行PCR
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