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        【求助】实时荧光定量PCR内参基因溶解曲线问题

        相关实验:间接原位 PCR(原位杂交PCR)

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        i二三肆

        请教各位大神,我最近做定量的时候内参基因的溶解曲线为什么会出现两种高度呀(图选中的彩色曲线为β-actin的,灰线为目的基因的),想向大家请教一下出现这种问题的原因,非常感谢!

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        4 个回答

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        bamboopiggy

        有帮助

        高度不是问题,只要起峰的位置一致就可以。

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        Dr_劉医生

        有帮助

        出现双峰就是引物特异性不好引起的,也可能是空气中有气溶胶污染所导致,可以先增加退火温度再试试看,如果没有改善,那么就需要重新更换引物啦。

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        汤姆卜丽波

        有帮助

        有可能是加样问题每个基因换个枪头加样的误差都会不同有一点差异都会导致结果不同

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        灵枢天问

        有帮助

        有可能是机器检测的原因。你看看你的ct值怎么样一致么

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