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        求解PCR问题

        相关实验:反向 PCR (inverse-PCR)

        user-title

        rrrlkkkk

        各位大佬,处理小白,有个问题咨询一下

        我看文献里面有个疑问:

        1.将miRNA转染到细胞后,培养细胞然后提取总RNA后,我怎么才能得到miRNA呢,文献里面没写,是用Northern blot找到吗?

        2.找到miRNA后,逆转录成cDNA,然后做PCR,最后他得到最终想要的miR-885-5P和CTNNB1 mRNA这两个片段,又是通过什么得到的呢

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        3 个回答

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        总RNA就全包括了,你后面逆转录要用的是你根据你自己的miRNA设计的特异性引物,得出的DNA就已经是你的特定样本了

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        提取总RNA后用miRNA特定的逆转录引物逆转录就会得到想要的miRNA了

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        1.提取total 的RNA里面也包含了miRNA,所以只要逆转录就行。

        2.他得到的miR-885-5p和ctnnb1 mRNA是设计引物,用realtime pcr进行检测的。

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