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        酿酒酵母酵母菌落pcr

        相关实验：反向 PCR （inverse-PCR）

        user-title

        wjhjh

        我想问一下各位大神 为什么我的酿酒酵母菌落pcr一直p不出来 换过引物换过Tm 是因为我这是诱变以后的菌吗？

        wx-share
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        4 个回答

        user-title

        dxy_l6elr7y5

        有帮助

        你试试先用大肠验证一下，如果有，再提取质粒转入酵母

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        你有positive control吗？如果positive control有条带，但是你的目的条带没有，就说明你的克隆都是阴性的。如果你只是蘸取是不行的，要确定体系里有足量的菌，我最近刚做过，发现如果菌少的话也是做不出来的，还有最好在原有预变性温度下增加1分钟，利于细胞裂解，最后电泳检测之前，10000rpm离心五分钟，使菌的裂解碎片完全沉淀，保证电泳是碎片的影响最小，因为有时候电泳菌的碎片会一起随条带前进，感染检测。

        user-title

        wjhjhuser-title

        我同样的方法做我师兄的菌能p出来 但是自己的就不行

        user-title

        Topmicro

        有帮助

        和你是否诱变过关系不大，你可以拿一个没有诱变过的作对照，跑一下看看。

        user-title

        wjhjhuser-title

        没有诱变过的 所有的引物都能跑出 提取dna也是不能跑出想要的片段

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        可以试试用蜗牛酶提取DNA以后作PCR

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