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        miRNA茎环法扩增不出来

        相关实验：逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR，rtpcr）

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        dxy_mnihr749

        用茎环法逆转录miRNA，做qPCR时扩增不出来，有人知道怎么回事吗

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        3 个回答

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        你这逆转录体系错了?茎环法最大的特点是其逆转录和qPCR都是序列特异性的，针对不同的miRNA，具有不同的茎环引物以及正向qPCR引物，从而极大程度地增加了检测的精确性和特异性。但是另一方面，由于茎环引物的特异性，针对同一样本中不同的目的miRNA，需要配制不同的逆转录体系。

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        确定是引物的问题吗？可以先用别的扩增排除一下是引物还是其他东西的问题

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        有没有做阳性对照？会不会是体系里的某些成分挂掉了。

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