real-time PCR 与 reverse-transcription PCR 有什么区别？

为什么reno晨说的RT-qPCR我完全木有听过？

reverse-transcription PCR 是逆转录PCR；Real-Time PCR是实时荧光定量pcr，前者底物是rna，后者底物是dna或者cdna

不知道是我一直没理解对？为什么reno晨说的RT-qPCR我完全木有听过？我只知道。。。PCR是普通DNA增值。qPCR （quantitative PCR）就是定量PCR，也叫Real-Time PCR，（我以前一直把RT当做 Real Time简称）指根据荧光标记每个cycle的荧光强度来测定样品中目标DNA的量，也因为本来不可视的DNA amplification cycle被荧光标记（probe）后可测定了可视了，所以叫做real time （即时可视）。RT 就是reverse transcription，就是RNA （包括mRNA，miRNA都是可以根据不同的primer选定来分别检测的）先被逆转录成单链cDNA（指转一次，所以转出来的量的多少等于mRNA量），然后用cDNA继续PCR，只不过这个PCR结合了荧光（probe）的标记，所以可以定量。定出来的量就是RNA表达量，合起来就是RT-qPCR。简单归纳就是PCR带RT的就是测定RNA，不带的就是DNA，带q的就是可定量，所以相对应就是 RT-PCR（RNA增值），

reverse-transcriptionPCR是把提取的RNA逆转录成为cDNA，RNA——cDNA，靠的是逆转录酶；RT-qPCR，Real-Time定量PCR，是用来扩增DNA，和普通PCR方法不同是加入了荧光染料（楼上说的SYBR只是一种），通过检测器检测到荧光信号变化来对扩增的DNA进行定量，DNA-DNA，靠的是DNA合成酶和DNA外切酶。简单来说reverse-transcriptionPCR是将不太好定量的RNA转化为DNA，RT-qPCR则是对DNA进行直接定量。

reverse-transcription PCR 是逆转录PCR，是指你提取的mRNA逆转成cDNA的过程。也是一般细胞实验中做RT-qPCR的第一步。RT-qPCR就是指以DNA（cDNA或者基因组DNA）为模板SYBR染料检测的实时荧光定量PCR，用来看mRNA的表达含量等。当然现在很多试剂盒，逆转PCR和RT-qPCR可以一起完成。