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        换新的一管酶,做实时荧光定量复合扩增的HRM曲线总是发现内参跑的不好,峰很低是怎么回事?

        相关实验:实时定量 PCR 实验

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        瑶妹AKFI

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        4 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        是不是你内参的引物用的时间比较久坏了?

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        1、引物设计不佳:避免二聚体和发夹结构的出现;2、引物浓度不佳:适当调整引物浓度;3、退火温度低:提高退火温度;4、镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度;5、模板中有基因组的污染:通过引物设计避免非特异扩增。

        user-title

        未来9

        有帮助

        可能是你的引物特异性比较差,存在大小相近的非特异性产物,可以利用高分辨率琼脂糖电泳确认

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        Eason老歌迷

        有帮助

        有很多种原因,比如说引物设计不好,引物浓度不够,退火温度低,镁离子浓度过高等

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