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        跑pcr,怎么避免非特异性条带

        相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

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        Eason老歌迷

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        4 个回答

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        bamboopiggy

        有帮助

        注意annealing temperature,可以适当提高

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        迟C迟

        有帮助

        1、设计特异性引物,这是避免非特异性条带最关键的点。

        2、提高退火温度,可提高目的条带特异性。

        3、PCR产物切胶回收,可得到特异性目的条带。

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        未来9

        有帮助

        必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸)。

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        天一湖医者

        有帮助

        提高退火温度,添加DMSO,冷启动,touchdown,更换更特异的引物,

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