跑pcr，怎么避免非特异性条带

注意annealing temperature，可以适当提高

1、设计特异性引物，这是避免非特异性条带最关键的点。

2、提高退火温度，可提高目的条带特异性。

3、PCR产物切胶回收，可得到特异性目的条带。

必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量，适当增加模板量，减少循环次数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸)。

提高退火温度，添加DMSO，冷启动，touchdown，更换更特异的引物，