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qPCR引物做預實驗融峰曲線是單峰但是ct值比較高,樣本cDNA-20放置半年,是不是應該考慮樣本的問題

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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細細的腰

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3 个回答

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bamboopiggy

有帮助

对,cdna虽然很tough但是如果-20放半年还是会有降解的。ct值会变高

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府宅

有帮助

也要考虑扩增效率低,可以降低退火温度,或选用二步法扩增;组分和体系充分混匀;优化反应程序;或尝试更换试剂。

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

模板浓度低或存在PCR抑制物,可以提高模板浓度;或提高RNA或cDNA稀释比例;或重新制备模板。

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