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为什么我跑出来的 PCR 条带在起跳前会有那么多小锯齿样波动,而人家的就是光滑的直线?

相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

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天寒梦深

为什么我跑出来的 PCR 条带在起跳前会有那么多小锯齿样波动,而人家的就是光滑的直线,而且跑出来的结果竟然会出现主复孔差异会有是十几多,会不会是和前面的杂波有关系,求各位大神指点迷津~
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1 个回答

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sayid

有帮助
注意看你的荧光曲线图的纵坐标数值,是不是很低(正常几万到几十万,你的是不是只有几千或者更低)?是不是你的曲线最终达到平台期后的数值很低。你这种情况多数是因为模板含量低或引物扩增效率低,没有出现强扩增,信噪比太低,起跳前的背景信号被放大出现杂波。因为信噪比大,检测信号其实很不准确,两孔差异就大了。建议换模板或者换引物,或者看看有没有其他体系添加失误的问题。
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