为什么我跑出来的 PCR 条带在起跳前会有那么多小锯齿样波动，而人家的就是光滑的直线？

相关实验：逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR，rtpcr）

天寒梦深

2013-05-13

为什么我跑出来的 PCR 条带在起跳前会有那么多小锯齿样波动，而人家的就是光滑的直线，而且跑出来的结果竟然会出现主复孔差异会有是十几多，会不会是和前面的杂波有关系，求各位大神指点迷津~

1 个回答

sayid

2013-05-16

有帮助

注意看你的荧光曲线图的纵坐标数值，是不是很低（正常几万到几十万，你的是不是只有几千或者更低）？是不是你的曲线最终达到平台期后的数值很低。你这种情况多数是因为模板含量低或引物扩增效率低，没有出现强扩增，信噪比太低，起跳前的背景信号被放大出现杂波。因为信噪比大，检测信号其实很不准确，两孔差异就大了。建议换模板或者换引物，或者看看有没有其他体系添加失误的问题。